پگاه امیری - دانشجوی کارشناسی ارشدگروه بیوتکنولوژی کشاورزی، دانشگاه صنعتی اصفهان
محمدعلی اسداللهی - استادیار گروه بیوتکنولوژی- دانشکده علوم و فناوریهای نوین، دانشگاه اصفهان
آذر شاه پیری - استادیار گروه بیوتکنولوژی کشاورزی، دانشگاه صنعتی اصفهان

مخمر ساکارومایسس سرویزیه 1 به دلیل وجود مسیر موالونات به طور طبیعی حاوی پیشماده ضروری سنتز مونوترپنوئیدها میباشد اما به دلیل فقدان ژنهای مونوترپن سنتازها قابلیت تولید این ترکیبات را ندارد. از این روبرای تولید مونوترپنوئیدهایی مثل لینالول در مخمر،بایستی یک مسیر جدید در آن ایجاد شود که توانایی تبدیلIPP های موجود درسلول را به لینالول داشته باشد. اگر چه با بیان ژن لینالول سنتاز از گیاه اسطوخودوس تولید لینالول تا به حال در این میکروارگانیسم امکانپذیرگردیده است اما به دلیل کمبودهححهای آزاد درون سلول، میزان سنتز آن بسیار کم است. افزایش سنتزIPPاز طریق افزایش فعالیت آنزیمهای کلیدی موجود در مسیر موالونات یکی ازراهکارهایی است که میتوان از طریق آن میزان تولید لینالول را در مخمر بالا ببرد. لذا در این تحقیق به منظورافزایش میزانهححمورد نیازسنتز لینالول در سلول، قسمت کاتالیتیک ژنHMGبه همراه ژن لینالول سنتاز در پلاسمید بیانیpESC-URAهمسانه سازی گردید. با انتقال سازواره مذکور به مخمر سویه ،CEN.PK 113-5D سویه 5D- pESC- HMG-LISایجاد شد. پس از استخراج لینالول با استفاده از روش استخراج فاز جامد، میزان سنتز لینالول طی آنالیزکروماتوگرافی گازیGC محاسبه گردید. مقایسه میزان سنتز لینالول در دو سویه5D- pESC- HMG-LIS,5D- pESC-LISسویه شاهد) نشان داد که بیش بیان ژنtHMGاز طریق بالابردن میزانIPPموجود در سلول و به بیان دیگر رفع محدودیت کمبودIPPباعث دو برابر شدن میزان سنتز لینالول در سویه مخمری5D- pESC- HMG-LISنسبت به سویه5D- pESC-LISگردید.

مخمر ساکارومایسس سرویزیه، ایزوپنتیل پیرو فسفات، لینالول، بیش بیان، استخراج فاز جامد