همسانه سازی ژن کیتیناز کایمری ChBD + Chit42 تحت پیشبر ساختگی القاء پذیر با بیمارگر به منظور بررسی عملکرد این پیشبرها در گیاه کلزا

یکی از مهمترین روش های ایجاد مقاومت در گیاهان در برابر بیمارگرها تراریخت نمودن آنها با ژنهای مقاومت مانند کیتیناز هاوگلوکانازها می باشد. از طرفی بیان دائم این ژنها تحت کنترل پیشبرهای دائمی، سبب هدر رفتن انرژی زیادی از گیاه در مراحل مختلف می شود و در نهایت به تغییرات نامطلوبی در کیفیت و کمیت محصول منجر خواهد شد. در این تحقیق ژن کیتیناز کایمریChBD +Chit42تولید شده، توسط آغازگرهای اختصاصی حاوی جایگاه های آنزیمی مناسب، تکثیر و در ناقل همسانه سازیpJET1.2 کلون گردید. بعد از هضم ناقص سازه و جداسازی ژن کایمر از روی ژل، این ژن، جایگزین ژنGUSدر سه سازه یpGFFناقلpGPTV حاوی پیشبرpGDDEE ،(SP-FFناقلpGPTVحاوی پیشبرSP-DDEEوpGMPناقلpGPTVحاوی پیشبر حداقلSP-MPبه عنوان کنترل منفی) شد و ناقلpBISM2 حاوی ژن کایمر تحت پیشبر دائمیCaMV35Sبه عنوان کنترل مثبت مورد استفاده قرارگرفت. پس از تائید مولکولی و توالی یابی، سازه های بیانی تائید شده، به آگرو باکتریوم سویهLBA 4404 منتقل شده و آماده انتقال به گیاه کلزا می باشند

Keywords:

آنزیم های کیتینازی , کلزا , پیشبر ساختگی القاء پذیر با بیمارگر , Antifungal activity