ایجاد کلکسیون سلولی پایدار و تمام نشدنی از شتر دوکوهانه به منظور حفاظت از ذخایر ژنتیکی کشور

شتر دوکوهانه جزو نژادهای بومی و در معرض انقراض کشوربوده و خاستگاه اولیه آن نیز ایران میباشد. حفظ و ثبت جهانی این نژاد به نام ایران اولین رسالت محققین کشور می باشد تا آیندگان فرصت استفاده از این موهبت خدادادی را داشته باشند. در این طرح برای تولید ردهسلولی، از شترهای دوکوهانه گله های مردمی و موسسات تحقیقاتی استان اردبیل نمونه گیری بعمل آمد. نمونه بافت پوست از 65 نفر شتردوکوهانه گرفته شد و در محیطDMEMدارای گلوکز کشت داده شد. پس از 14 روز سلولها مهاجرت کرده و کف بستر را پر کردند وبعد از دو پاساژ در ویالهایی با غلظت یک میلیون سلول فریز شدند. سلولها از نظر مورفولوژی، همگی فیبروبلاست بودند. روند تکثیر سلولها در روزهای 1و 4و 7و 14 مورد آنالیز قرار گرفت و منحنی رشد آنها رسم شد. تعداد 7رده سلولی به علت عدم تکثیر و مشاهدهآلودگی حذف شدند و تعداد 58 رده سلولی تولید گردید. عدم آلودگی میکروبی، قارچی، باکتریایی و مایکوپلاسمای تمامی رده ها به ترتیب با مشاهدات ماکروسکوپی و میکروسکوپی و روشهای کشت مستقیم وPCRمورد تائید قرار گرفت. عدم اختلاط و تایید گونه ای کلیه رده ها به روش PCRانجام گرفت و گونه شتر برای تمامی نمونه ها تائید شد. سپس با رعایت کلیه نکات مربوط به بانک کردن سلولها، ویالهای حاوی سلولهای به دست آمده به تانک ازت منتقل شدند. برای تمام نمونه ها شناسنامه، عکس از رده سلولی، عکس و مشخصات گونه و نژاد شتر نمونه برداری شده نیز تهیه گردید. نتایج مشخص می کند تولید رده سلولی از موجودات در حال انقراض یکی از کاربردی ترین، سریع ترین و اقتصادی ترین روشها بمنظور حفظ ذخایر ژنتیکی محسوب شده و یک بانک سهل الوصول برای دستیابی به نمونه های مختلف برای محققان و دانشجویان ایجاد می کند.

Keywords:

شتر دوکوهانه , ذخایر ژنتیکی , فیبروبلاست