مهسا اسدیان - گروه گیاه پزشکی دانشکده کشاورزی دانشگاه فردوسی مشهد
حمید روحانی - گروه گیاه پزشکی دانشکده کشاورزی دانشگاه فردوسی مشهد
مجتبی مرادزاده اسکندری - بخش تحقیقات گیاه پزشکی مرکز تحقیقات کشاورزی و منابع طبیعی خراسان رضوی
عصمت مهدیخانی مقدم - بخش تحقیقات گیاه پزشکی مرکز تحقیقات کشاورزی و منابع طبیعی خراسان رضوی

ذرت با نام علمیZea mays L. در بین گیاهان زراعی از جایگاه و اهمیت ویژهای برخوردار میباشد. آلودگی ذرت به گونههای آسپرژیلوس و آفلاتوکسین یک خطر جدی برای سلامت انسان و دام محسوب میشود. از اینرو، ردیابی آلودگیهای ذرت به گونههای قارچی بویژه آسپرژیلوسها یک امر مهم و ضروری است. تکنیکPCRبه علت دقت و حساسیت بالا میتواند روش مناسبی برای ردیابی سریع گونههای آسپرژیلوس باشد. در این پژوهش، امکان استفاده از واکنشPCRاختصاصی جهت ردیابی دو گونهی آسپرژیلوس در دانههای ذرت آلوده مورد بررسی قرار گرفت. بدینمنظور دانههای ذرت سترون بطورجداگانه با اسپور گونههای قارچیAspergillusA. parasiticus و flavusبه میزان 106 و 102 اسپور در هر گرم مایهزنی شدند. ذرتهای مایهزنی شده در محیط کشت زاپکس مایع به حجم 10 میلیلیتر در لولههای فالکن 50 میلیلیتری بر روی دستگاه شیکر با سرعت 50 دور در دقیقه در دمای 30-28 درجه سانتیگراد به مدت 48 و 72 ساعت نگهداری شدند. پس از استخراجDNAاز دانههای ذرت مذکور، واکنشPCRبا استفاده از آغازگرهای اختصاصی Ver496/Ver و 1391 FLA1/FLA2انجام شد. بررسی محصولPCRاز طریق الکتروفورز، حضور نوارهای اختصاصی 500 جفت بازی مربوط به گونهیA. flavusو895 جفت بازی مربوط به گونهیA. parasiticusنشان داد. بطور کلی نتایج این تحقیق نشان میدهد که آلودگی ذرت به این قارچها به میزان حداقل آنها ( 102 اسپور در هر گرم) با واکنشPCRمذکور قابل ردیابی است.

ذرت، آسپرژیلوس، ردیابی مولکولی