بررسی کارایی دو روش مختلف استخراج آنزیم Dnase از نمونه های پانکراس گاوی

ا Dnase (دئوکسی ریبونکلئاز) یک نوکلئاز است که در برخی از بافت های مهره داران از جمله غدد پانکراس و تیروئید، بخش هایی سیستم گوارشی، لوله های ادراری و ... یافت می شود . البته این آنزیم در نمونه های قارچ و باکتری نیز یافت شده و استخراج گردیده است . دئوکسی ریبونکلئاز از جمله آنزیم هایی است که در فرایندهای بیوتکنولوژی و پزشکی کاربرد بسیار زیادی دارد . این آنزیم با وزن مولکولی حدوداً 31 کیلو دالتون، به انتهای '5 DNA متصل شده و دو رشته DNA را از هم جدا می کند . از این آنزیم در آزمایشگاهای کشت باکتری برای کاهش ویسکوزیته DNA و خالص سازی RNA استفاده می گردد . همچنین در صنایع تولید مواد شوینده، دارویی و درمان بیماری هایی از جمله سرطان مورد استفاده قرار می گیرد.در این مطالعه با استفاده از دو روش مختلف سعی در استخراج آنزیم DNase و بررسی میزان کیفیت آن شد. ابتدا بخشی از پانکراس گوساله در دمای منفی 20 درجه فریز گردید . سپس پانکراس فریز شده کاملاً خرد و له می گردد . در روش نخست از بافرهای استخراجی (PMSF، Tris-HCl، NaCl، EDTA و DTT) و سولفات آمونیوم اشباع شده استفاده شد؛ این در حالی است که در روش دوم با استفاده از اسید، استخراج آنزیم بدون اضافه شدن بافر صورت می گیرد . در همه مطالعات انجام شده نشان داد که کارایی روش دوم برای استخراج DNase ازروش بافر بهتر بوده است . در نهایت می توان گفت استفاده ازاسید و سولفات آمونیوم جهت استخراج می تواند روشی مناسب جهت تولید انبوه آنزیم باشد .

Keywords:

ا Dnase , پانکراس , استخراج , دئوکسی ریبونکلئاز