زهره صدیق - پژوهشگر،دکترای تخصصی ویروس شناسی، بخش تولید واکسن های ویروسی پزشکی، موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی

مطالعات گذشته حاکی از عملکرد محافظت کننده برخی اپی توپ های خطی در پروتئین هماگلوتینین ویروس سرخک می باشد. به همین منظور و جهت بررسی فعالیت بیولوژیکی یکی از این اپی توپ ها DNA مکمل توالی کد کننده پروتئین کوتاه شده H که واجد اپی توپ مذکور است تکثیر و تعیین توالی شد و سپس در سویه های مناسبی از باکتری E.coli کلون و بیان گردید. در مرحله نخست ژنوم ویروس سرخک از سلول های Vero آلوده شده به این ویروس جدا شد. در مرحله بعد دو سوم انتهای '5 ژن H توسط پرایمرهای طراحی شده حاوی سیگنال ترشحی، با بکارگیری واکنش RT-PCR تکثیر شد وپس از تایید از طریق روش توالی یابی در ناقلهای مناسب کلونینگ و بیانی استقرار یافت. در این مرحله سویه BL21 باکتری E.coli توسط ناقل بیانی و به منظور تولید پروتئین نوترکیب ترانسفورم شد و در نهایت ا ستفاده از روش ها ی تکمیلی نظیر Gel Scanning، SDS-PAGE و وسترن بلات به کمک آنتی بادی پلی کلونال ویروس سرخک حضور مقادیر مناسبی از پروتئین H کوتاه شده را نشان داد. با توجه به نتایج بدست آمده از این بررسی، کلون های تهیه شده پس از انجام آز مایشات تاییدی و از جمله خنثی سازی ، جهت تولید و گسترش واکسن نوترکیب ضد سرخک کاربرد خواهند داشت.

ویروس سرخک، واکسن نو ترکیب، پروتئین کوتاه شده هماگلوتینین