شناسایی مولکولی گونه های آسپرژیلوس آلوده کننده ذرت علوفه ای سیلوهای شهرستان مرودشت و شیراز در استان فارس

بهداشت و سلامت خوراک مصرفی دام از عوامل تضمین کننده سلامت دام و فراورده های دامی است. یکی از عوامل آلوده کننده علوفه های ذخیره ای در سیلوها، آلودگی های قارچی به ویژه شبه جنس آسپرژیلوس است که علاوه بر خسارت مستقیم با تولید زهرابه باعث مسمومیت دام و فراورده های آن میشود. در این تحقیق از ذرت علوفه ای سیلوهای شهرستان مرودشت و شیراز نمونه برداری شد و ایزوله های قارچی آلوده کننده آن جداسازی و خالص گردید. ابتدا به روش مرفولوژیکی شبه گونه های جنس آسپرژیلوس با تهیه اسلایدهای میکروسکپی شناسایی گردید و در ادامه جهت شناسایی مولکولی، استخراج DNA با روش خرد کردن با گریندر انجام شد و با PCR و استفاده از جفت آغازگرهای یونیورسال ITS1/ITS4 و BT2a/BT2b قطعاتی به اندازه 500 تا 600 جفت باز از ژنهای ITS و بتاتوبولین تکثیر و تعیین ترادف شد و با بانک ژن مقایسه گردید. نتایج نشان داد شبه گونه های آلوده کننده از نمونه های شهرستان مرودشت و شیراز عبارتست از : ،A.flavus، A.nidulans ، A.versicolor ، A.niger،A.ochraceus، A.sydowii، A.fumigatus،A.oryzae و Emericella quadrilineata داده های این تحقیق نشان داد در اکثر موارد توالی ITS شبه گونه های این شبه جنس(به ویژه گونه های مشابه از نظر مرفولوژیک) با یکدیگر تشابه کامل دارند و قادر به تفکیک گونه ها نیست، درحالیکه استفاده از ژن بتاتوبولین با دقت بسیار بالاتری گونه ها را از یکدیگر تفکیک کرد. در کل می توان گفت ITS به تنهایی هیچگاه قادر به تفکیک اعضای زیر گونهای این شبه جنس نیست.

Keywords:

زهرابه , گریندر , مرفولوژی , آغازگر , PCR , بتاتولولین