شناسایی گونه های مختلف آیمریاهای جدا شده از طیور ایران به وسیله واکنش زنجیر پلیمراز (PCR)
Publish place: Journal of Veterinary Research، Vol: 59، Issue: 2
Publish Year: 1382
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: Persian
View: 536
This Paper With 6 Page And PDF Format Ready To Download
- Certificate
- من نویسنده این مقاله هستم
این Paper در بخشهای موضوعی زیر دسته بندی شده است:
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
JR_JVR-59-2_004
تاریخ نمایه سازی: 11 اردیبهشت 1394
Abstract:
هدف: شناسایی و تفکسک گونه های ختلف آیمریاهای طیور ایران با استفاده از روش (PCR). طرح: استفاده از نرم افزار آنالیز جمعیتهای ژنتیکی جهت تعیین ضریب شباهت. حیوانات: واحدهای مرغداری مرغ مادر، از 5 منطقه آب و هوایی ایران که واکسن کوکسیدیوز استفاده نکرده بودند، جهت نمونه برداری ا نتخاب و تعداد 114 نمونه بستر به طور تصادفی از این مرغداریها تهیه شد. روش: اواوسیست های موجود در نمونه ها به روش شناورسازی جدا و DNA آنها به وسیله فنل ک لروفرم و با استفاده از پروتئیناز K استخراج شد. برای شناسایی و تفکیک گونه های مختلف آیمریا از چهار جفت پرایمر اختصاصی طراحی شده از سکانس ناحیه (DNA, Internal transcribed spacer-1(ITS1 ریبو زومی آیمریا آسروولینا، آیمریا برونتی، آیمریانکاتریکس و آیمریاتنلا و یک جفت پرایمر یونیورسال BSEF-FSER که ناحیه ITS1 گونه های مختلف آیمریاها را تکثر می کند ا ستفاده شد. نتایج: DNA ژنوم اواوسیست های جدا شده از مدفوع طیور آلوده با پرایمرهای اختصاصی توسط واکنش زنجیر پلیمراز تکثیر و برحسب نوع گونه آیمریا یک قطعه DNA در ا ندازه 320 جفت باز (آیمریاآسروولینا)، 311 جفت باز (آیمریابرونتی)، 384 جفت باز (آیمریانکاتریکس) و 287 جفت باز (آیمریاتنلا) بر روی ژل آگارز حاوی اتیدیوم بروماید مشاهده شد. برای شناسایی گونه ها در نمونه هایی که آلودگی مخلوط داشتند و گ ونههای خالصی که برای آنها جفت پرایمر اختصاصی وجود نداشت از جفت پرایمر یونیورسال استفاده شد. در این بررسی 5 گونه آیمریاماکزیما، آیمریابرونتی، آیمریاتنلا، آیمریا آسروولینا و آیمریا میتیس شناسایی شدند که شناسایی و گزارش آیمریامیتیس و آیمریابرونتی برای اولین بار در ایران در این بررسی صورت گرفته است. ن تیجه گیری: در پایان با توجه به نتایج به دست آمده، جفت پرایمرها معرفی شده کاملاً اختصاصی ع مل نمودند و جفت پرایمر یونیورسال نیز توانست 5 گونه ایمریا را در نمونه های آلوده و همچنین نمونه هایی که برای آنها جفت پرایمر اختصاصی وجود نداشت را از یکدیگر تفکیک و مورد شناسایی قرار دهد. بنابراین تشخیص گونه های آیمریا با روش (PCR)، یک روش بسیار سریع، دقیق، آسان و ارزان است و نیاز به خالص سازی و تکثیر ندارد. پیشنهاد می گردد این روش به عنوان یک روش روزمره در آزمایشگاه های کشور که امکانات لازم را دارند مورد استفاده قرار گیرد. مجله دانشکده دامپزشکی دانشگاه تهران، (1383)، دوره 59، شماره 2، 130-125.
Authors
نسرین نوذری
سازمان دامپزشکی کشور تهران، تهران- ایران
باقر یخچالی
مرکز تحقیقات مهندسی ژنتیک و تکنولوژی زیستی تهران، تهران- ایران
صادق رهبری
گروه آموزشی انگل شناسی دانشکده دامپزشکی دانشگاه تهران، تهران- ایران
غلامرضا موذنی جولا
موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی حصارک کرج، کرج- ایران