استفاده از روش Nested-PCR برای تشخیص آلودگی کشت های سلولی به ویروس Pestivirus
Publish place: Journal of Veterinary Research، Vol: 63، Issue: 1
Publish Year: 1387
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: Persian
View: 653
This Paper With 7 Page And PDF Format Ready To Download
- Certificate
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
JR_JVR-63-1_003
تاریخ نمایه سازی: 11 اردیبهشت 1394
Abstract:
در این مطالعه یک روش Nested-PCR برای تشخیص دو ویروس BVDV از سویه NADL بهینه سازی گردید. در آزمایش RT-PCR قسمتی از منطقه غیرقابل ترجمه ناحیه 5 ویروس به طول 249 جفت باز تکثیر شد. محصول PCR دروکتور pTZ57R/T کلون گردید و نتیجه تعیین ردیف اسیدهای نوکلوتیدی آن اختصاصی بودن آزمایش را تأیید نمود. سپس پرایمرهای داخلی انخاب و ازمایش Nested-PCR انجام گردید و یک قطعه DNA به طول 155 جفت باز تکثیر شد. میزان حساسیت آزمایش 10TCID(5), RT-PCR و میزان حساسیت آزمایش Nested-PCR در تشخیص ویروس BVDV در کشت سلول، (10TCID(50 تعیین گردید. تعداد 7 نمونه از کشت های سلولی با سه روش PCR, ELISA و Nested-PCR مورد ازمایش قرار گرفتند. نتایج نشان داد که حساسیت روش های مولکولی در تشخیص ویروس در نمونه ها نسبت به روش ELISA بیشتر می باشد.
Keywords:
Authors
سیدعلی قرشی
گروه میکروبیولوژی، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری، تهران- ایران
مرتضی دلیری جوپاری
گروه میکروبیولوژی، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری، تهران- ایران
دینا مرشدی
گروه میکروبیولوژی، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری، تهران- ایران
ترانه حاجیان
گروه میکروبیولوژی، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری، تهران- ایران