مطالعه چند شکلی بخشی از اگزون و اینترون 2 زن لپتین و شناسایی SNP ها در این جایگاه در بز نژاد مهابادی با روش PCR- SSCP

لپتین پروتئینی 16 کیلودالتونی است که غالبا از بافت چربی سفید و اندکی در اپیتلیوم دستگاه گوارش و جفت ترشح شده و نقش مهمی در کنترل وزن بدن، خوراک مصرفی ، ایمنی، تولید شیر و تولید مثل دارد و محصول ژن چاقی (obs) است که توسط ژن بزرگی به نام ژن Ob کد می شود. هدف از این پژوهش مطالعه چند شکلی بخشی از اگزون و اینترون 2 ژن لپتین با روش PCR- SSCP در بز نژاد مهادبادی بود برای این منظور از تعداد 150 راس از بزها و بزغاله های مهابادی موجود در مزرعه آموزشی و پژوهشی گروه علوم دامی دانشگاه تهران (کرج) به صورت تصادفی خونگیری به عمل آمد استخراج DNA با استفاده از روش نمکی و تعیین کمیت و کیفیت ان توسط اسپکتروفتومتر و ژل آگارز 1% انجام شد تکثیر قطعه اختصاصی 271 جفت بازی از بخشی از اگزون و اینترون 2 ژن لپتین به کمک واکنش زنجیره ای پلیمراز انجام شد و برای بررسی چند شکلی این بخش از روش چند شکلی ساختاری رشته ها منفرد (SSCP) استفاده شد. پس از الکتروفورز نمونه ها روی ژل پلی اکریل آمید 12% با ولتاژ 300 ولت به مدت 21 ساعت ، رنگ آمیزی ژل ها با روش نیترات نقره طی سه مرحله تثبیت لکه گذاری و ظهور انجام شد در مجموع همه الگوهای به دست آمده شبیه به هم بود و این جایگاه برای افراد مونومورف بود. برای این جایگاه هفت جهش مشاهده شد که قبلا در بز گزارش و در NCBI ثبت شده بود.

Keywords:

لپتین , چند شکلی PCR-SSCP - SNP- , بز مهابادی