ایجادگیاه تراریخته زودگلده آرابیدوپسیس به روش خاموش کردن ژن CLF از طریق RNA silencing

پدیده ی گلدهی شامل تبدیل مریستم رأسی به مریستم گل میباشد که سپس همه ی بخش های گل از آن تشکیل خواهند شد. کنترل زمان گلدهی نیازمند آبشاری از فعالیت متوالی ژن هایی است که خود تحت کنترل فاکتورهای محیطی و درونی می باشند، به طوری که با خاموش کردن برخی از ژن های مهارکننده ی آغاز گلدهی مانند (Curly Leaf) CLF، می توان گیاهانی با فنوتیپ گلدهی سریع و زودهنگام تولید کرد که برای اهداف تحقیقاتی، کشاورزی، دارویی و زینتی می توانند کاربردهای فراوانی داشته باشند. در این تحقیق از تکنیکی مبتنی بر RNA Silencing در جهت کاربردی برای تسریع در گلدهی استفاده شد. برای تولید ساختارهای سنجاق سری (Hair pin)، قطعه ای از ژن CLF آرابیدوپسیس تالیانا توسط PCR تکثیر و با دو استراتژی کلونینگ، در دو جهت سنس و آنتی سنس درون وکتور pFGC5941 قرار گرفت. آنگاه ساختار سنجاق سری در این وکتور نوترکیب به واسطه ی آگروباکتریوم، به گیاه آرابیدوپسیس تالیانا انتقال یافت. گیاهان تراریخته ی بدست آمده، به منظور تایید حضور ترانس ژن در آنها، توسط PCR، RT-PCR بررسی شده و مطالعات روی فنوتیپ گلدهی و میزان خاموش شدن ژن CLF در نسلهای بعدی این گیاهان تراریخت نشان داد که کاهش بیان ژن CLF در آنها باعث افزایش بیان ژن (Flowering locus T) FT و در نهایت زودگلدهی آنها شده است. استفاده از این تکنیک به منظور ایجاد گیاهان زودگلده، یک روش جدید و سریع در بیوتکنولوژی است که می تواند برای سایر گیاهان مهم از نظر اقتصادی و حتی حصول صفات برتر دیگر قابل تعمیم باشد.

Keywords:

آرابیدوپسیس تالیانا , گلدهی , خاموشی ژن CLF , گیاه تراریخته ی زودگلده , RNA Silencing