تهیه و تولید نانوبادی با استفاده از تکنیک نمایش فاژی جهت مهار سالمونلا در عمق بافت

قطعات حاصل از انتهای آمین آنتی بادی های حاصل از شتر که قادر به تولید آنتی بادی هایی فاقد زنجیره سبک می باشند یا نانوبادی نام داشته و دارای توانایی کامل اتصال به آنتی ژن می باشند. برخی از مزایای نانوبادی ها قابلیت تولید آسان و انبوه آنها در میکروارگانیسم ها و توانایی استفاده از آنها در سیستم هایی از قبیل نمایش فاژی، مخمری یا ریبوزومی می باشد. نانوبادی ها دارای قابلیت نفوذ بالایی به درون بافت ها هستند و این ویژگی آنها ابزاری مناسب جهت مهار میکروارگانیزم می کند. سالمونلا از بیماری زا ترین گونه باکتری ها می باشد و با نفوذ به درون بافت خود را از سیستم ایمنی میزبان پنهان می کند. لیپوپلی ساکارید این باکتری یکی از عوامل اصلی توانایی این باکتری O باکتری سالمونلا نقش عمده ای در بیماری زایی آن ایفا می کند و آنتی ژن در مقابله با سیستم ایمنی می باشد. هدف این پژوهش تهیه نانوبادی هایی با قابلیت اتصال به لیپوپلی ساکارید باکتری سالمونلا تیفی موریوم ب ا استفاده از سیستم نمایش فاژی می باشد. به این منظور پس از جداسازی لنفوسیت ها از خون شتر غیر ایمن، Nested PCR توسط VHH تبدیل شدند. قطعات کد کننده cDNA به Oligo dT تخلیص و با استفاده از پرایمر های RNA الحاق شدند. فاژمید pComb3X به فاژمید SfiI بوسیله پرایمر های اختصاصی تکثیر شده و پس از هضم توسط آنزیم اندونوکلئاز منتقل گردیده و آزادسازی آنها توسط فاژ های کمکی E.coli XL1 Blue های نوترکیب با استفاده از الکتروپوریشن به باکتری m13k07 انجام شد.

Keywords:

نانوبادی , لیپوپلی ساکارید , سالمونلا تیفی موریوم , نمایش فاژی ,