سما شاملو - دانشجوی کارشناسی ارشد، گروه بیوتکنولوژی پزشکی، دانشکده علوم پزشکی دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران
مهدی فروزنده مقدم - دانشیار،گروه بیوتکنولوژی پزشکی، دانشکده علوم پزشکی دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران
ناصر امیری زاده - استادیار، مرکز تحقیقات سازمان انتقال خون، تهران، ایران

مقدمه: امروزه خون بندناف به عنوان منبع جایگزینی برای سلول های بنیادی خونی تبدیل شده است. اگرچه ، در مقایسه با سلول های بنیادی مغز استخوان و خو نمحیطی، تعداد سلول های بنیادی دریک واحد خو نبندناف محدود بوده، لذا پیوند موفق آن در بیماران بزرگسال به آسانی مقدور نیست. یک را هکار برای غلبه بر این مشکل ، ازدیاد سلو ل های بنیادی خونساز بندناف با افزایش فعالیت خودبازیابی این سلول ها است. Zfx یک فاکتور رونویسی است که در سلول های بنیادی جنینی و خون ساز بیان افزایش یافته ای دارد. به تازگی مشخص شده است که این پروتئین در خودبازیابی سلول های بنیادی نقش مهمی دارد.هدف: در این مطالعه سعی شده تا با افزایش بیان ژن Zfx در سلول های CD34+⁺ HSC به کمک یک وکتو لنتی ویروسی، میزان توانایی خودبازیابی و در نتیجه ازدیاد آن ها را افزایش دهیم.روش: در این تحقیق ژن Zfx با استفاده از RT-PCR از سلول های بنیادی +CD34 ،تکثیر و در وکتور لنتی ویروسی pLEX-MCS کلون شد. پارتیکل های ویروسی استفاده از این سازه و پلاسمید های کمکی در سلول های HEK293T تولید شدند. سپس سلول های بنیادی خون ساز بندناف جدا شده با ستون MACS،با ویرو سها ترنسدیوس شدند، طی کشت میزان افزایش بیان ژن Zfx با استفاده از Real-time PCR به صورت کمی بررسی شد. پس از اتمام دور هی 10 روزه ی کشت، سلول ها از نظر نشانگر سطحی CD34 با استفاده از فلوسایتومتری ارزیابی شدند. نتایج: نتایج نشان داد، افزایش بیان ژن Zfx با استفاده از وکتور لنتی ویروسی در سلو لهای +UCB CD34،به طور مؤثر اتفاق می افتد و این افزایش بیان، منجر به ازدیاد سلو لهای +CD34 در مقایسه با سلول های دستورزی نشده می شود.

خودبازیابی،سلول های +CD34 ، خون بند ناف،ژن Zfx،وکتور لنتی ویروسی