حمیده افقی - عضو هیات علمی- پژوهشکده بیوتکنولوژی- سازمان پژوهشهای علمی و صنعتی ایران- تهران
علی صالح زاده - عضو هیات علمی- گروه میکروبیولوژی- دانشگاه آزاد اسلامی واحد رشت- ایران
فاطمه متولی - کارشناس بخش هپاتیت و ایدز-انستیتو پاستور ایران - تهران

در این تحقیق هورمون کلسی تونین نوترکیب انسانی بصورت یک پپتید پیش ساز توسط مخمر Pichia pastoris بیان شده است. ژن کامل هورمون کلسی تونین انسانی در وکتور pPICZαA تحت کنترل پروموتر AOX1 کلون گردیده و وکتور نوترکیب با روش الکتروپوریشن به سویه مخمری KM71H(muts) ترانسفورم گردید.آنالیزهای مولکولی شامل PCR، تعیین توالی، هضم با آنزیم های محدود کننده و کشت مخمر در غلظت های افزایشی آنتی بیوتیک زئوسین نشان داد که ژن کلسی تونین با موفقیت به ژنوم مخمر اینتگره شده است. حضور پپتید مورد انتظار که وزن مولکولی حدود 5/5 کیلودالتون داشت بوسیله آنالیز SDS-PAGE

هورمون کلسی تونین- مخمر Pichia pastoris - پپتید نوترکیب