رامین ترشیزی - کارشناس ارشد بیوشیمی، گروه آموزشی زیست شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه آزاد اسلامی واحد علوم و تحقیقات تهران، ایران
مهدی زین الدینی - دکترای تخصصی بیوشیمی، استادیار، پژوهشکده فناوری زیستی، دانشگاه صنعتی مالک اشتر، تهران، ایران
علیا صغر دلدار - دکترای تخصصی ژنتیک مولکولی، استادیار، پژوهشکده فناوری زیستی، دانشگاه صنعتی مالک اشتر، تهران، ایران
پریچهر یغمایی - دکترای تخصصی فیزیولوژی، دانشیار، گروه آموزشی زیست شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه آزاد اسلامی واحد علوم و تحقیقات تهران، ایران

هدف - هدف این کار تحقیقاتی دستیابی به ترادف آپتامری از DNA است که بصورت اختصاصی بتواند ترینیتر و تولوئن (TNT) را شناسایی نماید. روش - با استفاده ار پرایمرهای اختصاصی و کتابخانه تصادفی از نوکلئوتیدها (دو ترادف 19 و 21 بازی مشخص جهت اتصال پرایمرها و 78 باز تصادفی در وسط)، تکثیر قطعات نوکلئوتیدی (PCR) انجام گرفت. به منظور انجام SELEX با استفاده از نانوذرات مغناطیسی و ماده واکنشگر EDC ، تثبیت TNT با استفاده از ماده تجاری TNP-BSA (TNT متصل شده به پروتئین آلبومن) صورت پذیرفت. پس از غربالگری اولیه، مجدد PCR بر روی قطعات جدا شده از نانوذرات و نوکلئوتیدهای نشاندار با دیاکسیژنین (DIG) تکرار گردید. در ادامه جهت ارزیابی عملکرد آپتامر در شناسایی TNT مورد مطالعه قرار گرفت. در نهایت نیز ترادف مربوطه در پلاسمید pBluescript کلون و تعیین ترادف گردید. نتیجه تحقیق - آپتامر کلون شده دارای کارایی مناسب در شناسایی TNT بوده و می تواند به عنوان آپتاسنسور شناساگر TNT در مطالعات آتی استفاده گردد.

آپتامر، TNT، کلون، ELONA, SELEX