فاطمه سمیعی - دانشجوی دکتری بیماری شناسی دانشگاه آزاد اسلامی واحد علوم و تحقیقات تهران
محمد رضا صفرنژاد - عضوهیئت علمی بخش تحقیقات ویروس شناسی موسسه تحقیقات گیاه پزشکی کشور
سید قاسم حسینی سالکده - عضو هیئت علمی بخش ژنومیکس پژوهشکده بیوتکنولوژی کشاورزی ایران

ویروس تریستزای مرکبات مهم ترین بیمارگر مرکبات می باشد، بدلیل گسترش و شیوع بیماری در ایران مدیریت کنترل آن اهمیت بسزایی دارد از اینرو تشخیص به موقع و ارزان بیماری نیاز به بکارگیری روش مناسب دارد و جهت تهیه آنتی بادی برای تشخیص نیاز به تامین منبع آنتی ژن ویروسی می باشد. در این تحقیق ژن پروتئین پوششی ویروس تریستزا(CTV-cp25) ازنمونه های آلوده جداسازی و سپس این ژن دروکتور بیانی pET28a(+) همسانه سازی شد واین وکتور بیانی حاوی ژن مورد نظر واردباکتری Ecoli سویه BL21 گردید و به مدت یک شب در محیط LB و دمای 37 درجه همراه با تکان رشد داده شد و پس از واکشت در روز بعد، بیان پروتئین پوششی با استفاده از IPTG القا گردید. جهت بهینه کردن شرایط بیان پروتئین، ابتدا دو فاکتور دما و مدت زمان انکویه شدن باکتری در حضور IPTG مورد بررسی قرارگرفت. تیمارهای زمانی به صورت (2، 4 و 6ساعت) و تیمارهای دمایی به صورت (28، 30 و 37 درجه سانتی گراد) بودند که پس از القاء انجام آزمایش، بهترین نتایج در دمای 28 درجه طی زمان 4 ساعته بدست آمد ونمونه برداری در زمان های مختلف پس از القاء انجام شد و پروتئین محلول با استفاده از کروماتوگرافی میل ترکیبی استخراج و در SDS-PAGE تفکیک شد، نتایج این تحقیق نشان داد که cp ویروس در سلول باکتری بیان شد.

ویروس تریستزای مرکبات، پروتئین پوششی