فرناز اقبال پور - مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی انستیتو پاستورایران- دانشگاه پردیس علوم و تحقیقات استان مرکزی-اراک
فرزانه برخورداری - مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی انستیتوپاستور ایران
فاطمه دوامی - مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی انستیتو پاستور ایران

بیان موقت پروتئین (Transient Gene Expression) TGE روش رایجی برای بیان پروتئین های نوترکیب دربازه زمانی کوتاه می باشد. بهینه سازی شرایط کشت سلولی در راستای رشدمناسب و تولید بیشینه در سلول های نوترکیب CHO در روش بیان ژن موقت، (TGE) از اهمیت ویژه ای در صنعت بیوفارماسوتیکال برخوردار می باشد. در این تحقیق با هدف بهینه سازی تنظیم بیان ژن در فرایند (TGE) به ترتیب با ثابت نگه داشتن میزان دانسیته سلولی، غلظت PEI و DNA در سلول های CHO DG44 تولید کننده پروتئین نوترکیب t-PA کشت داده شده در 3محیط کشت فاقد سرم ProCHO5,CDDG44 و BRC در شرایط معلق در Shaking incubator میزان بهینه از این سه فاکتور موثر در ترانسفکشن مشخص شد. نتایج فلوسایتومتری در این تحقیق بیشترین میزان TGE در سلول های CHODG44 تولید کننده t-PA را در غلظت cell/ml، ا106×0.5 دانسیته سلولی شروع کشت، 1.5μg/ml از PEI و cell/ml ا106/ 0.5gμ از DNA به ترتیب با 52.8% ، 28.71%، 38.68% ترانسفکشن نشان داد.

پروتئین نوترکیب، سیستم بیان ژنی موقت، PEI، سلول CHO DG44