بهینه سازی بیان موقت ژن در گیاه اسنفناج به روش آگرواینجکشن با حامل ویروسی PVX
Publish place: 8th national biotechnology congress of I.R. Iran & 4th National Conference on biosecurity
Publish Year: 1392
نوع سند: مقاله کنفرانسی
زبان: Persian
View: 839
This Paper With 5 Page And PDF Format Ready To Download
- Certificate
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
NBCI08_0851
تاریخ نمایه سازی: 29 شهریور 1394
Abstract:
پروتئین فلور سنت سبز به عنوان ژن گزارشگر ایده آل در مهندسی ژنتیک به منظور بهینه سازی سیستم انتقال ژن و بیان آن کاربرد فراوان دارد . در این تحقیق بهینه سازی سیستم بیان موقت در گیاه Spinaciaolerace با استفاده از زن گزارشگر GFP توسط وکتور ویروسی انجام گرفت . برای این منظور ژن تقویت شده (Egfp) از وکتور گیاهی غیر ویروسی PK7WG2D,1 با طراحی آغاز گرهای مناسب با توجه به توالی های دو انتهای ژن ،محل های برشی مناسب، تکثیر و پس از جداسازی ، در ناقل بیانی PVX همسانه سازی شد . به منظور اطمینان از همسانه سازی، سازه تهیه شده با استفاده از بررسی های کلونی PCR، PCR و هضم آنزیمی مورد تایید قرار گرفت . سازه نهائی pVX-Egfp تایید شده خاوی ژن Egfp به روش شوک حرارتی به باکتری آگروباکتریوم سویه GV3101 منتقل گردید و در مرحله آخر انتقال آگروباکتریوم نوترکیب به روش Agroinjection به گیاه اسفناج صورت گرفت . بیان موقت پروتئین در برگ های اسفناح توسط نور فلورسنس دیده شد .
Keywords:
بیان موقت , ناقل ویروسی موزاییک X سیب زمینی - اسفناج
Authors
فریده نوری
سازمان پژوهشهای علمی و صنعتی ایران، پژوهشکده بیوتکنولوژی و دانشگاه پیام نور تهران
حمیده افقی
پژوهشکده بیوتکنولوژی - سازمان پژوهشهای علمی و صنعتی ایران - تهران
پرستو احسانی
انستیتو پاستور ایران، بخش بیولوژی مولکولی ، تهران ایران