مونا شفقی - تهران، انستیتو پاستور ایران، بخش بیولوژی مولکولی
رحیمه رسولی - تهران، انستیتو پاستور ایران، بخش بیولوژی مولکولی
انیس جعفری - تهران، انستیتو پاستور ایران، بخش بیولوژی مولکولی
پرستو احسانی - تهران، انستیتو پاستور ایران، بخش بیولوژی مولکولی

در دوه دهه گذشته، سیستم های بیان گیاهی به عنوان بستری مناسب برای تولید پروتئین های درمانی توسعه یافته اند . گیاهان نسبت به دیگر سیتم های بیانی، از جمله سیتسم های باکتریایی و حیوانی دارای مزایای قابل ملاحظه ای می باشند . ناقلهای ویروسی گیاهی استراتژی نوید بخشی را برای بیان موقت ژن در گیاهان ارائه می کنند . دستکاری ژنتکی در این سیتسم های بیان گذار، در مقایسه با بیان پایدار پروتئین های نوترکیب ، بسیار آسان تر می باشد . همچنین این سیستم ها می توانند پروتئین های نو ترکیب را بسیار سریع تر تولید کنند . در این پژوهش ، یک وکتور بیانی بیانی از الحاق ژن اپتیمایز شده زنجیره سنگین آنتی بادی ضد ویروس هاری (Hea) و PVX (یک وکتور ویروسی گیاهی) ، بمنظور بیان موقت این ژن در گیاه ، ساخته شد. سپس توالی های Kozak و KDEL به ترتیب به انتهای 5 و 3 ژن Hea افزوده شدند . آغازگرهای مناب با توجه به توالی های دو انتهای ژن Hea و محل های برشی مناسب طراحی شدند . در نهایت ژن Hea پس از تکثیر توسط PCRدر ناقل ویروسی PVX همسانه سازی شد . ناقل بیانی حاوی ژن مورد E. coli تکثیر و سپس به باکتری Agrobacterium tumefaciens منتقل گردید . نتایج همسانه سازی این ژن با تفستفاده از روش های مولکولی ColonyPCR هضم آنزیمی و در نهایت توالی یابی مورد تایید قرار گرفت . بدنی ترتیب اگروباکتریوم نو ترکیب به منظور انتقال ژن Hea با روش اگرواینفیلتر اسیون به گیاه تنباکو، آماده سازی شد .

ناقل ویروسی گیاهی، آنتی بادی ضد هاری ، همسانه سازی، انتقال ژن ، اگرواینفیلتر اسیون