ارزیابی ژن های کنترل داخلی به منظور مطالعه بیان کمی ژن ها در بافت های مختلف گونه های A. Dracunculus و A. Absinthium

جنس آرتمیزیا شمار زیادی از گیاهان معطر را شامل می شود که مصارف گوناگون داروئی و تغذیه ای دارند که ترخون A. Dracunculus و افسنطین A. Absinthium از جمله مشهورترین آنها می باشند. به جهت بررسی میزان تغییرات بیان ژن های تولیدکننده مواد موثره دارویی در این گیاهان، ازواکنش زنجیره ای پلیمراز کمی درزمان حقیقی استفاده می گردد. به جهت کنترل خطاهای وارده در مراحل مختلف، انتخاب روش دقیقی برای نرمال سازی اهمیت دارد. در میان روش های متعدد نرمال سازی، استفاده از ژن های خانه دار به عنوان کنترل کننده های داخلی در آنالیز بیان ژن عمومیت دارد. دراین مطالعه پایداری بیان هفت ژن ,cpr ,pal ,18s rRNA ,act ,ubq EF1α و rsp9 در بافت های مختلف گونه های A. dracunculus و A. absinthium بررسی شد. بدین منظور استخراج RNA از سه بافت برگ، ساقه و ریشه و ساخت cDNAانجام گرفت. داده های حاصل از واکنش Real time PCRبوسیله نرم افزار NormFinder مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت. نتایج حاصل نشان داد که در میانبافت های گونه A. dracunculus ژن های act ، pal و UBQ پایدارترین ژن های کنترل داخلی هستندو در گونه A. absinthium ژن های EF1 و 18S rRNA به عنوان ژن مرجع مناسب معرفی گردید. این نتایج نشان می دهند که ژن های خانه دار به صورت کاملا متفاوتی در بین گونه های مختلف گیاهی تنظیم می شوند والگوی بیانی متفاوتی دارندو اعتبار سنجی آن ها قبل از استفاده ضروری به نظر می رسد.

Keywords:

نرمال سازی , واکنش زنجیره ای پلیمراز کمی در زمان حقیقی , A. dracunculus , A. Absinthium