CIVILICA We Respect the Science
(ناشر تخصصی کنفرانسهای کشور / شماره مجوز انتشارات از وزارت فرهنگ و ارشاد اسلامی: ۸۹۷۱)

تولید آنتی بادی های پلی کلونال علیه پروتئین های کدشده توسط ژن های ناحیه اختصاصی مردان در کروموزوم Y انسان

عنوان مقاله: تولید آنتی بادی های پلی کلونال علیه پروتئین های کدشده توسط ژن های ناحیه اختصاصی مردان در کروموزوم Y انسان
شناسه ملی مقاله: NBCI08_1054
منتشر شده در هشتمین همایش بیوتکنولوژی جمهوری اسلامی ایران و چهارمین همایش ملی امنیت زیستی در سال 1392
مشخصات نویسندگان مقاله:

مهدی علیخانی - پژوهشگاه رویان ، پژوهشکده زیست شناسی و فناوری سلول های بنیادی جهاد دانشگاهی، مرکز تحقیقات علوم سلولی، گروه زیست شناسی سامانه های مولکولی،
مهدی شریفی تبار - پژوهشگاه رویان، پژوهشکده زیست شناسی و فناوری سلول های بنیادی جهاد دانشگاهی، مرکز تحقیقات علوم سلولی، گروه زیست شناسی سامانه های مولکولی،
زهره جنگروی - پژوهشگاه رویان، پژوهشکده زیست شناسی و فناوری سلول های بنیادی جهاد دانشگاهی، مرکز تحقیقات علوم سلولی، گروه زیست شناسی سامانه های مولکولی،
پوریا پارسامتین - پژوهشگاه رویان، پژوهشکده زیست شناسی و فناوری سلول های بنیادی جهاد دانشگاهی، مرکز تحقیقات علوم سلولی، گروه زیست شناسی سامانه های مولکولی،

خلاصه مقاله:
کروموزوم Y در انسان برای تمایز و شکل گیری بیضه و نیز اسپرماتوژنز ضروری است. بنابراین، بررسی بیان پروتئین های بیان شونده توسط این کرموزوم در بافت های گوناگون به ویژه بافت بیضه از اهمیت ویژه ای برای درمان بیماران مبتلا به ناهنجاری های مربوط به کروموزوم Y و نیز تعیین نقش احتمالی آنها برخوردار است. لازمه بررسی بیان و عملکرد پروتئین ها استفاده از آنتی بادی های باقدرت اتصال اختصاصی بالا می باشد. از این رو، این طرح به تولید آنتی بادی های پلیکلونال مناسب برای ژن های ناحیه اختصاصی مردان در کروموزوم Y اختصاص یافت. بدین منظور نواحی اختصاصی پروتئین ها با استفاده از نرم افزارهای بیوانفورماتیکی جهت استفاده به عنوان آنتی ژن طراحی گردید. سپس استخراج RNA و ساخت cDNA از بافت های بیضه، پروستات ولاین های سلولی انجام گرفت و پس ازکلون بخش های مربوطه بر روی وکتور بیانی پروکاریوتی pET-28a، پروتئین نوترکیب آنها تولید و با استفاده از ستون های کرموتوگرافی خالص سازی شد. در نهایت پروتئین های خالص سازی شده پس از تایید توسط روش طیف سنجی جرمی درفواصل زمانی معین به خرگوش های نژادسفید نیوزلندی تزریق و پس از اتمام این ایمن سازی، عمل خونگیری و جداسازی سرم انجام گرفت. در پایان کیفیت آنتی بادی های تولیدی با استفاده از روش های الایزا، ایمنو هیستو شیمی و وسترن بلات بررسی گردید.

کلمات کلیدی:
آنتی بادی پلی کلونال، کلونبنگ، ناباروری، ناحیه اختصاصی کروموزوم Y

صفحه اختصاصی مقاله و دریافت فایل کامل: https://civilica.com/doc/377646/