شرایط استخراج بهینه DNA درگیاه دارویی کرچک با ترکیبات پلی فنولی بالا

استخراج DNA باکیفیت وکمیت بالا یک نیاز بنیادی درعلوم زیست شناسی سلولی و مولکولی می باشد. استخراج DNA از بافت گیاهی به دلیل وجود ترکیبات پلی ساکارید، پروتئین ها و پلی فنل ها شامل فلاونوئیدها و سایر متابولیت های ثانویه که در استخراجDNA ژنومی دخالت می کنند چالش مهمی است. همچنین از آنجا که این ترکیبات با جداسازی ژنومی و واکنش های پایین دست مانند تجزیه آنزیم محدود کننده و تقویت ژن مداخله می کنند روش های استخراج DNA باید برای به حداقل رساندن این ترکیبات تعیین شوند. این مطالعه بهینه شده روش قابل اطمینان و سریع Cetyltrimethyl ammonium bromide (CTAB) را شرح می دهد که نسبت به روش های دلاپورتا و CTAB معمولی به طور خاص برای استخراج DNA از گیاهان کوچک بهینه سازی شده است. همچنین در این پرتکل فقط ایزوآمیلوالکل و کلروفرم استفاده می شود و از فنول که سمیت بالا دارد استفاده نمی شود. نسبت جذب A260/280 از DNA استخراج شده فاقد هرگونه پلی ساکارید، پلی فنول و تانن های آلوده کننده درمحدوده 1.7 تا 1.8 نشان دهنده سطح بالایی از خلوص DNA استخراجی می باشد.

Keywords:

استخراجDNA , پلی فنول , پلی ساکارید , CTAB