همسانه سازی ژن PA20 در باکتری E. Coli سوش DH5α

ژن PA20 مسئول کد کردن یک قسمت از پروتئین سطحی در باسیلوس انتراسیس عامل بیماری سیاه زخم است که بدلیل غیر سمی بودن می توان از ان در ساخت واکسن استفاده کرد. برای نگهداری و تکثیر قطعات DNA از پلاسمیدهای مختلفی براساس هدف محققین استفاده می شود. در این آزمایش از پلاسمید کلونینگ pUC حاوی ژن PA20 به عنوان وکتور انتقال، نگهداری، تکثیر و از باکتری E. coli سویه DH5α به عنوان باکتری حامل پلاسمید استفاده شد پلاسمید pUC با روش شوک حرارتی به باکتری E. coli انتقال یافت که پس از کشت درمحیط جامد حاوی آمپسیلین و مشاهده تک کلون ها استنباط شد که باکتری تراریخت شده است. پس از تکثیر تک کلون ها، استخراج پلاسمید، انجام PCR و روئیت آن بر روی ژل آگارز وجود پلاسمید و ژن درون باکتری E. coli اثبات گردید.

Keywords:

باکتریE. Coli , همسانه سازی , پلاسمید Puc , ژن PA20 , باکتری باسیلوس آنتراسیس