Construction of heat inducible expression plasmids for the production of recombinant proteins in Escherichia coli
Publish place: 04th National Biotechnology Congress of Iran
Publish Year: 1384
نوع سند: مقاله کنفرانسی
زبان: English
View: 2,208
متن کامل این Paper منتشر نشده است و فقط به صورت چکیده یا چکیده مبسوط در پایگاه موجود می باشد.
توضیح: معمولا کلیه مقالاتی که کمتر از ۵ صفحه باشند در پایگاه سیویلیکا اصل Paper (فول تکست) محسوب نمی شوند و فقط کاربران عضو بدون کسر اعتبار می توانند فایل آنها را دریافت نمایند.
- Certificate
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
NBCI04_105
تاریخ نمایه سازی: 30 دی 1386
Abstract:
In order to express human granulocyte-macrophage colony stimulating factor (hGM-CSF) under heat shock, two expression plasmids was constructed based on pBC(SK) plasmid. The expression cassettes in the two plasmids are equipped with a 75 base pair fragment, derived from the PL promoter of the bacteriophage lambda (_). The plasmids also contain a temperature mutant of repressor coding gene (CI857) to regulate the promoter activity. The two plasmids differ from each other in having a transcription termination signal or not, down stream to the recombinant gene in the expression cassette. A pelB signal sequence was also used in order to have the recombinant protein in the periplasmic space of Escherichia coli. The efficiency of the constructed plasmids was demonstrated by heat-regulated expression of hGM-CSF. The protein analysis of the recombinant bacteria, containing either of the two plasmids, indicates in a successful expression and complete processing of the hGM-CSF precursor, following the heat shock activation of the _PL promoter. In order to enhance the applicability of the terminator containing plasmid, for the expression of other proteins of interest by heat regulation, a multiple cloning site including eleven unique restriction sites was inserted in the plasmid. The heat-regulated plasmids, designed in this work, have provided suitable tools to study the expression of recombinant proteins under temperature up-shift in Escherichia coli, when use of chemical inducers are not desirable.
Keywords:
Heat shock-induction , PL promoter , CI857 gene , periplasmic expression and human granulocyte-macrophage colony stimulating factor (hGM-CSF)
Authors
Fariba Ataei
Institute for Genetic Engineering and Biotechnology.
Alireza Zomorodipour
National Institute for Genetic Engineering and Biotechnology.
Hossein Ghanbarian
Drug Applied Research Center, Research & development Complex, Tabriz University of Medical Sciences, Tabriz-Iran
Bagher Yakhchali
Drug Applied Research Center, Research & development Complex, Tabriz University of Medical Sciences, Tabriz-Iran
مراجع و منابع این Paper:
لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این Paper را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود Paper لینک شده اند :