Construction of heat inducible expression plasmids for the production of recombinant proteins in Escherichia coli

Publish Year: 1384
نوع سند: مقاله کنفرانسی
زبان: English
View: 2,208

متن کامل این Paper منتشر نشده است و فقط به صورت چکیده یا چکیده مبسوط در پایگاه موجود می باشد.
توضیح: معمولا کلیه مقالاتی که کمتر از ۵ صفحه باشند در پایگاه سیویلیکا اصل Paper (فول تکست) محسوب نمی شوند و فقط کاربران عضو بدون کسر اعتبار می توانند فایل آنها را دریافت نمایند.

  • Certificate
  • من نویسنده این مقاله هستم

استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:

لینک ثابت به این Paper:

شناسه ملی سند علمی:

NBCI04_105

تاریخ نمایه سازی: 30 دی 1386

Abstract:

In order to express human granulocyte-macrophage colony stimulating factor (hGM-CSF) under heat shock, two expression plasmids was constructed based on pBC(SK) plasmid. The expression cassettes in the two plasmids are equipped with a 75 base pair fragment, derived from the PL promoter of the bacteriophage lambda (_). The plasmids also contain a temperature mutant of repressor coding gene (CI857) to regulate the promoter activity. The two plasmids differ from each other in having a transcription termination signal or not, down stream to the recombinant gene in the expression cassette. A pelB signal sequence was also used in order to have the recombinant protein in the periplasmic space of Escherichia coli. The efficiency of the constructed plasmids was demonstrated by heat-regulated expression of hGM-CSF. The protein analysis of the recombinant bacteria, containing either of the two plasmids, indicates in a successful expression and complete processing of the hGM-CSF precursor, following the heat shock activation of the _PL promoter. In order to enhance the applicability of the terminator containing plasmid, for the expression of other proteins of interest by heat regulation, a multiple cloning site including eleven unique restriction sites was inserted in the plasmid. The heat-regulated plasmids, designed in this work, have provided suitable tools to study the expression of recombinant proteins under temperature up-shift in Escherichia coli, when use of chemical inducers are not desirable.

Keywords:

Heat shock-induction , PL promoter , CI857 gene , periplasmic expression and human granulocyte-macrophage colony stimulating factor (hGM-CSF)

Authors

Fariba Ataei

Institute for Genetic Engineering and Biotechnology.

Alireza Zomorodipour

National Institute for Genetic Engineering and Biotechnology.

Hossein Ghanbarian

Drug Applied Research Center, Research & development Complex, Tabriz University of Medical Sciences, Tabriz-Iran

Bagher Yakhchali

Drug Applied Research Center, Research & development Complex, Tabriz University of Medical Sciences, Tabriz-Iran

مراجع و منابع این Paper:

لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این Paper را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود Paper لینک شده اند :
  • Borjaliloo, S., Z omorodipour, A., Yakhchali, B., Shojai, S. Iran. ...
  • Burnett, V., Springer, D., Biotechniques 26, 30-34. (1999) ...
  • Ghanbarian H., Z omorodipour A., Ataei F., Shojai S., Yakhchali ...
  • Gupta, C.J., Jaisani, M., Pandey, G., Mukheijee, K.J., J. Biotechnol. ...
  • Lammli, UK. Nature. Vol, 227: 680-685. (1970). ...
  • Libby T.R., Braedt G., Kronheim R.S., March J.C., Urdal L.D., ...
  • Love, A., Lilly, E., Dixon, E., Gene. 176, 49-53. (1996) ...
  • Makrides SC. Microbiol Rev. .60:512-538. (1996) ...
  • Mie schendahl, M., Hill, M.B... J. bacterial. Dec. 1366-1369 (1985) ...
  • _ Nucleic Acids Res. Jul 25;1 1 (14):4677-88. (1983) ...
  • 1-Sambrook J, Rucell D. Molecular Cloning: A Laboratory Manual. Cold ...
  • 2 3 4 5 6 7 8 _ 10 11 ...
  • : pZAY5-2 at 37?C. Lane 3: pZGY3 at 378C. Lanes ...
  • نمایش کامل مراجع