همسانه سازی ژن آنزیم کراتینیناز نوترکیب از باکتری Pseudomonas pseudoalcaligene در باکتری E.coli
Publish Year: 1393
نوع سند: مقاله کنفرانسی
زبان: Persian
View: 776
This Paper With 7 Page And PDF Format Ready To Download
- Certificate
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
CBGCONF02_412
تاریخ نمایه سازی: 9 فروردین 1395
Abstract:
آنزیم کراتینیناز(کراتینین آمیدوهیدرولاز)[EC 3.5.2.10] ، یک پروتئین هوموهگزامر به خانواده بزرگ آمیدوهیدرولازها تعلق دارد، مطالعه ساختاراولیه آنزیم و ) 2+ نشان دهنده این است که این آنزیم با توجه به توالی نوکلئوتیدی 780 جفت بازی دارای 259 اسیدآمینه میباشد. این آنزیم یک متالو آنزیم وابسته به روی( zn ) است . فعالیت این آنزیم کاتالیز واکنش رفت و برگشتی تبدیل کراتینین به کراتین می باشد که از لحاظ ارزیابی بالینی محتویات کراتینین سرم و 2+ منگنز( Mn ادرار دارای اهمیت ویژه ای است. در این تحقیق هدف همسانه سازی ژن کراتینینازسویه Pseudomonas pseudoalcaligene strain KF707 در .E coli DH5α میباشد، ابتدا ژن سنتز شده موجود دروکتورPGH و وکتور (+)pET-28a توسط آنزیم های برشی NdeIو XhoIبرش داده شده و محصولات حاصل ازهضم آنزیمی توسط آنزیم T4 DNA Ligase بهم متصل شده و محصول Ligation(وکتور نوترکیب) درون باکتریE. coli مستعد شده ترانسفورم گردید وروی محیط لوریا برتانی (LB) آگار حاوی کانامایسین کشت داده شد. به منظور تایید صحت همسان هسازی، ColonyPCR ، تعیین توالی (Sequencing ) و هضم آنزیمی وکتور نوترکیب استخراج شده با آنزیم های محدودگر Nde1 وXho1 انجام گردید. نتایج تایید کننده همسانه سازی ژن آنزیم کراتینینازسویه KF707دروکتوربیانیpET28 درفریم صحیح می باشد. بررسی بیان وفعالیت آنزیم درمطالعات بعدی انجام خواهد شد.
Keywords:
Authors
زهرا امینی بیات
هیات علمی پژوهشکده بیوتکنولوژی، سازمان پژوهش های علمی و صنعتی ایران
امیر حسن فرضعلی زاده
دانشجوی کارشناسی ارشد، دانشگاه آزاد اسلامی واحد علوم داروئی تهران
الناز افشاری
دانشجوی کارشناسی ارشد، دانشگاه آزاد اسلامی واحد علوم داروئی تهران
محبوبه نظری
هیات علمی پژوهشکده نانو بیوتکنولوژی، پژوهشگاه ابن سینا
مراجع و منابع این Paper:
لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این Paper را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود Paper لینک شده اند :