اثر کاهش بیان HIF1a بر روی چرخه سلولی و میزان بقاء رده سلولی HeLa

فاکتور القا شونده به وسیله هیپوکسی (HIF1a) یک هترو دایمر متشکل از دو زیر واحد HIF1a و HIF1b می باشد. زیرواحد B به طور دائمی بیان می شود اما زیرواحد پروتیینی HIF1a یک تنظیم کننده مهم در پا سخ به هیپوکسی و کمبود اکسیژن است و در انواع مختلف سرطان و متاستاز مثل سرطان سینه و رحم به شدت افزایش بیان پیدا می کند. HIF1a یک فعال کننده رونویسی است و به عنوان تنظیم کننده اساسی در هموستاز اکسیژن ضروری بوده و نقش اصلی را بازی می کند و نقش مهمی در شرایط کمبود اکسیژن ( هیپوکسی ) با فعال کردن رونویسی تعداد زیادی از ژن ها به عهده دارد. این ژن ها شامل ژن های درگیر در مسیر متابولیسم انرژی ، رگزایی و آپوپتوز می باشد. HIF1a یک کاندیدای مناسب بسیار مطلوب برای مهار و بهبود درمان سرطان می باشد. در این مطالعه اثر ناک داون HIF1a روی چرخه سلولی و بقاء رده سلولی HeLa بررسی شد . مواد و روش ها: siRNA اختصاصی علیه HIF1a به وسیله نرم افزارهای بیوانفورماتیکی مناسب طراحی شد. رده سلولی HeLa به وسیله siRNA اختصاصی علیه HIF1a 24 به وسیله لیپوفکتامین به عنوان یک حامل ترانسفکت شد. 24، 48 و 72 ساعت بعد از ترانسفکت RNA کل از سلول های ترانسفکت شده و نشده استخراج شد و بیان HIF1a با استفاده از RT-PCR مورد برر سی قرار گرفت. چرخه سلولی و میزان بقاء سلول ها به ترتیب به و سیله فلو سایتومتری و روش MTT مورد بررسی قرار گرفت . نتایج : تجزیه و تحلیل داده ها حاصل از نتایج RT PCR نشان می دهد که در 48 ساعت بعد از ترانسفکشن سلول های HeLa با siRNA درمقایسه ه با سلول های ترانسفکت نشده بیان ژن HIF1a به مقدار قابل توجهی کاهش یافته است. داده های مربوط به فلوسایتومتری و تست MTT نشان می دهد که ناک داون HIF1a اثر قابل توجه و معنی داری بر رویچرخه سلولی و بقای سلول های HeLa دارد.

Keywords:

فاکتور القا شونده به وسیله هیپوکسی , متاستاز , siRNA و سرطان درمانی