بررسی بیماری نکروز عصبی ویروسی ) VNN) در تاس ماهی ایرانی به روش مولکولی

بیماری VNN یک بیماری ویروسی است که سیستم عصبی تعدادی از ماهیان اقتصادی دنیا را تحت تاثیر قرار داده و با واکئولاسیون بافت مغز ، نخاع و شبکیه چشم همراه بوده و علائم بالینی و کالبد گشایی شامل : شنای نا متعادل و چرخشی و باد کردگی کیسه شنا را ایجاد می نماید . بدنبال تلفاتی که در بهمن ماه 1384 در ماهیان کفال طلائی دریای خزر Liza auratus رخ داد و نیز توسط دو مرکز رفرانس در ژاپن و تایوان وجود بیماری VNN رادر این ماهیان به روش RT-PCR تایید گردید . در سال 2004 نیز محقق یونانی به صورت تجربی ابتلای ما هیان خاویاری را گزارش نمود . از آنجا که ماهیان خاویاری دریای خزر از گنجینه های ارزشمند کشورمان محسوب می شود و به دلیل همزیستی این ماهیان با ماهیان کفال ماهیان احتمال میرفت که RT- بیماری فوق به ماهیان خاویاری منتقل گردد، بدین منظور این تحقیق در ماهیان خاویاری با استفاده از آزمایشاتPCRبر روی 56 نمونه بافت ( شامل : مغز، چشم،تخمک و اسپرم ) از مولدین نر وماده تاسماهی ایرانی صید شده از سواحل جنوب غربی دریای خزر ( طی بهار و تابستان (1386 صورت پذیرفت . این بررسی ها با استفاده از کیت تشخیصی IQ2000 انجام گردید. برای این منظور RNA نمونه ها با استفاده از بافرهای تامین شده از کیت استخراج گردید و برای ارزیابی کیفیت RNA با ژل آگارز 2-1 درصد الکتروفورز شد . نمونه های RNA بعنوان الگو در واکنش RT- PCR استفاده گردید . برای اثبات وجود باندPCR شاخص بیماری VNN میزان 4 میکرولیتر از محصو ل PCR بر روی ژل آگارز 2 درصد الکتروفورز شد و با اتیدیوم برماید رنگ آمیزی گردید . طبق نمونه ارائه شده در کیت تمامی نمونه های فاقد بیماری VNN میبایست باند PCR به اندازه 630 جفت باز bp تولید نمایند که در کلیه 56 نمونه بافت های بررسی شده باند 630 bp تولیدشد . این بررسی اولیه نشان داد که طبق آزمایشات مولکولی فوق نمونه های بررسی شده فاقد نودا ویروس عامل بیماری نکروز عصبی ویروسی میباشند .