صهبا طوسی - دانشجوی کارشناسی ارشد بیوتکنولوژی کشاورزی دانشکده کشاورزی، دانشگاه فردوسی مشهد
فرهاد شکوهی فر - عضو هیات علمی پژوهشکده علوم گیاهی، دانشگاه فردوسی مشهد
سعید ملک زاده شفارودی - اعضای هییت علمی گروه بیوتکنولوژی و به نژادی گیاهان زراعی دانشکده کشاورزی، دانشگاه فردوسیمشهد
عبدالرضا باقری - اعضای هییت علمی گروه بیوتکنولوژی و به نژادی گیاهان زراعی دانشکده کشاورزی، دانشگاه فردوسیمشهد

بیان موقت یک ژن اثرگذار در بیماریزایی (effector)در گیاه میزبان با استفاده ازاگرواینجکشن، یک روش قابل قبول برای بررسی نقش ژن در بیماری زایی است. در این مطالعهتاثیر دو سویه اگروباکتریوم بر چهار رقم استاندارد و دو رقم محلی خربزه در بررسی بیان موقتمورد ارزیابی قرار گرفت. سازگاری سویه های LBA4404 و GV3101به وسیله تزریق سلول هایباکتری به برگ ارقام خربزه تعیین شد. زنده مانی سلول های اگروباکتریوم تزریق شده در بافتبرگ به وسیله ارزیابی بیان پروکاریوتی ژن 24 GUSساعت پس از تزریق تعیین شد. سویه LBA4404 پس از انتقال ناقل pCAMBIA3301 دارای ژن GUS اینتروندار به عنوان کنترلمثبت برای تایید بیان موقت این ژن در سلول های گیاه استفاده شد. انتقال ناقل های pBI121 و pCAMBIA3301 به سویه LBA4404 با روش کلنی PCR با آغازگرهای PSh3-F/R تاییدشد. راندمان بیان موقت در برگ های ارقام خربزه، 48ساعت پس از اگرواینجکشن سویه LBA4404 حامل ناقل pCAMBIA3301 به وسیله سنجش هیستوشیمیایی ژن GUSمشخصشد. برگهای تزریق شده با سویه LBA4404 دارای ناقل pBI121 فعالیت ژن GUS را نشاندادند که تایید کننده زنده بودن سلول های اگروباکتریوم در برگ ارقام خربزه بود. تمام ارقامژن GUS را به صورت موقت با استفاده از اگرواینجکشن پس از گذشت 24ساعت بیان کردند.این نتایج می تواند در مطالعات آینده به منظور بررسی عملکرد ژن های اثرگذار منتخب دربرهمکنش با ارقام استاندارد خربزه مورد استفاده قرار گیرد

ارقام استاندارد خربزه،اگروباکتریوم،بیان موقت،سنجش GUS