مدیفیکاسیون شیمیایی پروتیین آلبومین سرم گاوی با استفاده از PEG Succinimidyl Carbonate

آلبومین مهمترین پروتیین پلاسمایی خون انسان است که دارای چندین اتصالات آبگریز بوده و معمولا به عنوان حامل بسیاری از لیگاند ها مثل اسید های چرب و هورمون های محلول در چربی به مانند بسیاری از داروها، ایفای نقش می کند. عملکرد طبیعی این حامل ، وجود جایگاه های اتصال متعدد برای لیگاند و برهمکنش های درون سلولی؛ منطقی برای استفاده از این پروتیین در فرآیندهای دارورسانی می باشد. سامانه دارورسانی (DDS) یک تکنولوژی مهندسی شده برای تاثیر گذاری بر جایگاه های خاص و کنترل ترشح عوامل درمانی است. مدیفیکاسیون شیمیایی یکی از بهترین راهکارها برای بهبود دارورسانی می باشد.کنترل و هدف گذاری سامانه ی دارورسانی منجر به بهبود توزیع زیستی داروها، افزایش چرخه ی نیمه عمر و همچنین افزایش زمان نگهداری داروها در محیط زیست های کوچک و به علاوه افزایش کارایی و کاهش تاثیرپذیری از جایگاه های مربوطه می گردد. سامانه ی دارورسانی بر اساس آلبومین ؛شامل نانوذرات دارویی آلبومین ،پروتیین های متصل به آلبومین، پیش داروها و پپتیدهای مشتق از آن است که با اتصالات کوالانت یا فیزیکی به آلبومین متصل شده اند. مدیفیکاسیون های شیمیایی یکی از رایج ترین روش های مطالعه ی روابط عملکردی و ساختاری پروتیین ها می باشد. مطالعات بسیار نشان داده است که ساختار سوم و فعالیت زیستی پروتیین به خواص فیزیکوشیمیایی آمینواسیدهای تشکیل دهنده ی آن بستگی دارد. بنابراین مدیفیکاسیون های شیمیایی آنزیمی و غیر آنزیمی در ریشه های خاص پروتیین موجب تغییرات مهم در ساختار و عملکرد آن می گردد. پگیلاسیون یک رویکرد موثر برای افزایش انحلال پذیری زیستی پروتیین و کاهش فعالیت ایموژنیسیتی و کاهش سمیت آن می باشد.بر این اساس پس از اتصال بیومولکول مورد نظر با پگ خواص فیزیکوشیمیایی تغییر می کند که موجب افزایش سیستم نگهداری از عوامل دارویی در بدن می شود. در همین راستا در این مطالعه ما علاقه مند شدیم اثر پگیلاسیون بر خواص فیزیکو شیمیایی پروتیین آلبومین را مورد ارزیابی قرار دهیم. برای ارزیابی اثر مدیفیکاسیون روی خواص فیزیکوشیمیایی آلبومین سرم گاوی، این پروتیین توسط پلی اتیلن گلیکول فعال شده متوکسی سوکسینیمیدیل کربنات (mPEG-SC) در دمای 4 درجه سانتیگراد به مدت 12 ساعت انکوبه شد. در این مطالعه اثرات پگیلاسیون روی خواص فیزیکوشیمیایی آلبومین به وسیله SDS-PAGE و تغییرات ساختار دوم آلبومین نیز با دو رنگ نمایی دورانی (CD) بررسی شد. نتایج SDS-PAGE راندمان بالای پگیلاسیون آلبومین را در شرایط آبی نشان داد. در این مطالعه مشخص شد، پگیلاسیون ریشه های لیزین و/ یا هیستیدین البومین سرم گاوی باعث اقزایش انحلالیت و عدم تغییرات چشمگیر کانفورماسیونی آن می شود.بنابراین می توان پگیلاسیون آلبومین را جهت اهداف دارورسانی، در مقیاس بزرگ مورد ارزیابی قرار داد.

Keywords:

آلبومین , مدیفیکاسیون شیمیایی , خواص فیزیکوشیمیایی پگیلاسیون