شناسایی فوماریک اسید به عنوان آنتاگونیست جدید گیرنده های TLR4 با استفاده از مطالعات Inslicoو Invitro

گیرنده های شبه تول (TLRs) یکی از خانواده های مهم از گیرنده های تشخیص الگو (PPRs) هستند که در سیستم ایمنی جانوران عالی بخصوص انسان نقش حیاتی ایفا می کنند. داروهای مهار کننده این گیرنده و مسیر پیام رسانی آن در درمان عفونت های حاد و سرطان و بیماری های خود ایمنی یا در برانگیختن سیستم ایمنی ، تنظیم برنامه ی سلولی و… نقش مهمی ایفا می کنند، از این رو شناسایی ترکیبات دارویی فعال کننده ی این پروتیین بخصوص با منشاء گیاهی می تواند بسیار مفید باشد. بدین منظور، از تکنیک غربالگری مجازی با کارایی بالا (High Throughput Virtual Screening)بر روی کنفورمر های بیش از 57000 ترکیب فعال استخراج شده از گیاهان دارویی موجود در بانک اطلاعاتی TCM استفاده شد .جهت تعیین بهترین لیگاندهای متصل شونده در چهار نرم افزارICM-Pro ،Schrodinger 2015 ،CLC Drug Discovery ،MOE پروسه ی داکینگ انجام گردید. سپس تست های فارماکودینامیک توسط توسط نرم افزار BIOVIA Discovery Studio 2016 انجام گرفت. نهایتا، فوماریک اسید به عنوان یک کاندیدای آنتاگونیست TLR4 انتخاب و به منظور ارزیابی و تایید نتایج کموانفورماتیکی، آنالیزهای برون تن در کشت PBMCs انسانی با تیمار غلظت های مختلف فوماریک اسید و لیگاند اختصاصی TLR4 (لیپو پلی-ساکارید باکتریایی) انجام پذیرفت و تغییرات بیان سایتوکاین های پیش التهابی IL-1β و TNF-α )که در التهاب، رشد و حمایت از تکثیر سلولی وپسرفت تومور و... نقش دارند) توسط آزمایشات qPCR بررسی گردید. مطالعات آزمایشگاهی کاهش شدید رونویسی بر فاکتور هسته ی کاپا B (NFKB) و ژن القا کننده ی سلول های اندوتلیال انسانی (TNFα) را در اثر تیمار فوماریک اسید نشان داد که تایید کننده ی نتایج Insilico می باشد.

Keywords:

فوماریک اسید , غربالگری مجازی با کارایی بالا , گیاهان دارویی , qPCR , TLR4