طراحی و تولید سازه بیان کننده AID در جهت تولید سویه ای mutator

ا Activation-induced cytidine deaminase(AIDیک آنزیم اختصاصی لنفوسیت های B مسیول هایپرموتاسیون سوماتیک و نوترکیبی تعویض کلاس ژن های آنتی بادی در لنفوسیت های B مراکز زایگر در ارگان های لنفوییدی محیطی می باشد. افزایش بیان نابه جای این آنزیم منجر به موتاسیون در سلول های غیر از لنفوسیت های B و حتی در باکتری Escherichia coli شده است. سیستم های بیانی با دما بر اساس پروموتر های چپ و یا راست باکتریوفاژ لامبدا متکی به یک پروموتر تنظیمی قوی هستند و با موفقیت در تولید بسیاری از پروتیین های نوترکیب مورد استفاده قرار گرفته اند. از آن جاییکه موتاسیون های القایی نیازمند شرایط به شدت تنظیم شده هستند، به نظر می رسد بیان آنزیم AID تحت پروموتر القایی با دمای باکتریوفاژ لامبدا منجر به تولید پروتیین های کارامدتر می شود. بنابراین هدف این مطالعه تولید یک سازه mutator تشکیل شده از ژن AID تحت کنترل پروموتر چپ باکتریوفاژ لامبدا در باکتری Escherichia coli می باشد. برای دستیابی به این هدف،کلون ژن AID در یک وکتور بیانی القایی با دما که توسط رپرسور حساس به دمای cI857 باکتریوفاژ لامبدا تنظیم شده، انجام شد. نتایج حاصل از تعیین توالی، سازه طراحی شده را تایید نمود.

Keywords:

اAID , سویه mutator , پروموتر چپ فاژ لامبدا