ردیابی مولکولی باکتری عامل بیماری میوه سبز مرکبات مبتنی بر تکنیک های استخراج دی ان ای با غشاء نیتروسلولزی و PCR
Publish place: First International Conference and the National Conference on Agriculture, the Environment and food Security
Publish Year: 1395
نوع سند: مقاله کنفرانسی
زبان: Persian
View: 292
متن کامل این Paper منتشر نشده است و فقط به صورت چکیده یا چکیده مبسوط در پایگاه موجود می باشد.
توضیح: معمولا کلیه مقالاتی که کمتر از ۵ صفحه باشند در پایگاه سیویلیکا اصل Paper (فول تکست) محسوب نمی شوند و فقط کاربران عضو بدون کسر اعتبار می توانند فایل آنها را دریافت نمایند.
- Certificate
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
AEFSJ02_340
تاریخ نمایه سازی: 13 شهریور 1396
Abstract:
واکنش زنجیره ای پلیمراز، حساسترین، مطمین ترین و عمومی ترین روش جهت ردیابی مولکولی عامل بیماریگرینینگ (میوه سبز) مرکبات بشمار می رود. استفاده از این تکنیک مستلزم تهیه دی ان ای از بافت گیاهی و انجامPCR با روش های غالبا پیچیده و زمانبر می باشد. در این تحقیق ما یک روش استخراج دی ان ای مبتنی بر کاغذنیتروسلولزی در تلفیق با واکنش زنجیره ای پلیمراز با استفاده از آغازگرهای اختصاصی را برای ردیابی باکتری عاملگرینینگ بهینه سازی نمودیم. برای این منظور ابتدا رگبرگ های حاصل از درختان مرکبات سالم و مبتلا به بیماریگرینینگ بدون استفاده از ازت مایع در محلول NaOH-EDTA پودر و روی کاغذ نیتروسلولزی لکه گذاری شد. سپسلکه ها از روی کاغذ پانچ شده و دی ان ای متصل به آنها با قرار دادن کاغذ نیتروسلولز در دمای 90 درجه سانتیگراد بهمدت 10 دقیقه، در آب مقطر استریل رها سازی و برای انجام واکنش زنجیره ای پلیمراز با استفاده از جفت آغازگراختصاصی fp400/rp400 مورد استفاده قرار گرفت. کارایی ردیابی باکتری عامل بیماری میوه سبز به این روش با سایرروش ها و دستورالعمل های آزمایشگاهی در آزمون های واکنش زنجیره ای پلیمراز مستقیم و آشیانه ای مورد مقایسه قرارگرفت. روش معرفی شده در این تحقیق سریع و ارزان بوده و بویژه برای ردیابی باکتری عامل بیماری میوه سبز در باغاتو نهالستان های مرکبات که همزمان تعداد زیادی نمونه بایستی مورد بررسی قرار گیرد بسیار مناسب است. کاغذ هایلکه گذاری شده می توانند برای مدتی نگهداری شده و یا براحتی به آزمایشگاه های مرجع برای ردیابی مولکولی عاملبیماری ارسال شوند.
Keywords:
Authors
سمانه موسی زاده
بخش تحقیقات گیاه پزشکی، مرکز تحقیقات و آموزش کشاورزی و منابع طبیعی جنوب استان کرمان، سازمان تحقیقات و آموزش کشاورزی،جیرفت، ایران و دانشگاه آزاد اسلامی واحد جیرفت، جیرفت، ایران
مهدی آزادوار
بخش تحقیقات گیاه پزشکی، مرکز تحقیقات و آموزش کشاورزی و منابع طبیعی جنوب استان کرمان، سازمان تحقیقات و آموزش کشاورزی،جیرفت، ایران و دانشگاه آزاد اسلامی واحد جیرفت، جیرفت، ایران