سارا مستوفی - کارشناس ارشد گروه میکروبیولوژی، دانشکده علوم، دانشگاه آزاد اسلامی لاهیجان
منصور مشرقی - دانشیار گروه زیست شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه فردوسی مشهد و عضو گروه تحقیقات بیوتکنولوژ سلولی و مولکولی، پژوهشکده فناوری زیستی، دانشگاه فردوسی مشهد
معصومه بحرینی - استادیار گروه زیست شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه فردوسی مشهد
فاطمه عروجعلیان - دانشجوی دکتری نانوبیوتکنولوژ، دانشکده علوم و فنون نوین، دانشگاه تهران

توانایی ردیابی یک میکروارگانیسم خاص در شرایط محیطی بسیار دشوار است. بسیاری از ژن ها مانند ژن لوسیفراز باکتریایی(luxAB) با ایجاد فنوتیپ های منحصر به فردی مانند تولید نور بیولومینسانس باعث ایجاد افتراق در سویه ها می شوند. در تحقیق حاضر ژن luxAB در دو پاتوژن مهم گیاهی سودوموناس سرینجی6 و رالوستونیا سولاناساریوم7 توسط روش الکتروپوریشن کلون گردید. برای لاکس مارک دار کردن سویه های فوق از ترانسپوزون miniTn-5 luxAB استفاده گردید. سویه های خالص شده با پلاسمید pUT که شامل ژن های luxAB بوده در دستگاه الکتروپوریتور، ترانسفورم گردیدند. الکتروپوریشن سویه های فوق در ولتاژkv 2/5 و در مدت زمان 5 میلی ثانیه انجام گردید. تمامی سویه های لاکس مارک دار شده توانایی رشد در محیط کشت کینگ ب8 حاوی 12/5 میکروگرم در هر میلی لیتر از محیط کشت تتراسیکلین را دارا بودند. به علاوه، اندازه گیری میزان شدت نور لومینسانس توسط دستگاه لومینومتر حاکی از الحاق موفقیت آمیز ژن luxAB در دو باکتری فوق می باشد. سویه های لاکس مارکدار شده سودوموناس سرینجی و رالوستونیا سولاناساریوم به علت بیان پایدار نور لومینسانس، پتانسیل لازم را برای مطالعات بعدی در زمینه اثر شرایط مختلف محیطی بر بقا و فعالیت یک باکتری پاتوژن را دارا می باشند.

سودوموناس سرینجی، رالوستونیا سولاناساریوم، ژن luxAB ، ردیابی