امید صابری خمامی - گروه زیست شناسی، دانشگاه گیلان، پردیس دانشگاهی ۲، رشت، ایران
حسین غفوری - گروه زیست شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه گیلان، رشت، ایران

چپرون های مولکولی از جمله پروتیین های شوک حرارتی از عوامل حیاتی برای بقای سلول ها هستند و در تاخوردگی صحیح پروتیین ها نقش اساسی را بازی می کنند. پروتیین شوک حرارتی 70 مولکولی است که فعالیت چپرونی وابسته به هیدرولیز آدنوزین تری فسفات داشته و برای تداوم عملکرد خود به پروتیین های با دمین J نیاز دارد تا آنرا به سوبسترا متصل کنند. ما در این مطالعه به اثر دما و pH بر میزان بیان پروتیین نوترکیب Hsp70 ماهی Rutilus Frisii Kutum در باکتری E. Coli پرداختیم. ژن hsp70 ماهی Rutilus Frisii Kutum با استفاده از وکتور pET-28a (+) به باکتری E. coli ترانسفورم شد. جهت تعیین شرایط بهینه، بیان Hsp70 را در زمان های 2، 4، 6،8، 12، 24، 36، 48 ساعت، دماهای 20، 25، 30، 45 ، 37 درجه سلسیوس و و PH های 7.5، 5، 9 مورد مطالعه قرار دادیم. میزان بیان پروتیین با استفاده از ژل SDS-PAGE 12% رنگ آمیزی کوماسی آبی و نرم افزار MN مورد ارزیابی قرار گرفت. پروتیینHsp 70 نوترکیب در زمان 2 ساعت، دمای 20 درجه و PH9 کمترین میزان و در زمان 4 ساعت، دمای 37 درجه و PH=5 بیشترین بیان را دارد. شرایط بهینه جهت بیان Hsp 70 نوترکیب در دمای 37 درجه و PH=5 می باشد. مطالعات ساختاری و نیز تاثیر عوامل دیگر بر بیان این پروتیین در حال مطالعه است.

پروتیین شوک حرارتی، تاخوردگی پروتیین ، E. coli، ،Rutilus Frisii Kutum، چپرون