لاتین Pet24 تحت پروموتور T7 کلون و بیان مولکولی فاکتور محرک گرانولوسیت- ماکروفاژ در حامل بیانی
Publish Year: 1395
نوع سند: مقاله کنفرانسی
زبان: Persian
View: 496
نسخه کامل این Paper ارائه نشده است و در دسترس نمی باشد
- Certificate
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
BIOCONF19_530
تاریخ نمایه سازی: 22 دی 1396
Abstract:
فاکتور محرک گرانولوسیت - ماکروفاژ یکی از چهار گلیکوپروتیین ویژه ای است که در تولید سلول های رده گرانولوسیت و مونوسیت نقش دارد و به خاطر تاثیر آن در رشد جمعیت های مختلف سلول های خونی، جهت بهبود بی نظمی های خونسازی در بیماری های خونی در کلینیک کاربرد دارد. در تحقیق حاضر به منظور بهینه سازی ژن GMCSF انسانی و سنتز آن، کلونینگ در وکتور Puc18-SamI و میزبان E .coli و DH5α انجام شد. به منطور دستیابی به قطعه ژن مورد نظر، هضم آنزیمی با استفاده از آنزیم های Ndel و BamH1 صورت گرفت. ژن در حامل بیانی pET24 تحت پروموتور T7 جاسازی شد و در E .coli Bl21 و DE3 ساب کلون گردید. سلول ها به صورت over night در محیط LB واجد کانامایسین رشد داده شدند و پس از القا با IPTG پروتیین به صورت انکلوژن بادی بیان شد. محلول سازی پروتیین نوترکیب با استفاده از ماده احیاکننده DDT انجام شد. بیان پروتیین نوترکیب با استفاده از وسترن بلات تایید گردید. نتایج وسترن بلات وجود باندی مطابق با استاندارد kD 14/5 را نشان داد که تایید کننده بیان پروتیین و وجود ژن در میزبان بود. این تحقیق به منظور دستیابی به کابردهای دارویی GMCSF در درمان سندرم های میلودیسپلازی، میلوساپرسیو ناشی از شیمی درمانی یا پیوند مغز استخوان و به عنوان ادجوانت واکسنی، انجام شد
Authors
لیلا وردست زاده سردرود
دانشکده فناوری های نوین پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی گلستان، گرگان، ایران
عزت الله ضرغامی
دانشکده علوم نوین پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی تبریز، تبریز، ایران
مجید شهبازی
مرکز تحقیقات سلولی و مولکولی، دانشگاه علوم پزشکی گلستان، گرگان، ایران