بهینه سازی شرایط انحلال اینترفرون بتا 1-b

اینترفرون بتا 1-b یک پروتیین نوترکیب درمانی غیرگلیکوزیله است که به صورت اینکلوژن بادی در باکتری اشیرشیا کلی بیان می شود. انحلال اینکلوژن بادی ها با یک روش مناسب در فرآیندهای پایین دستی پروتیین های تولید شده به صورت اینکلوژن بادی از اهمیت زیادی برخوردار است. هدف این تحقیق مقایسه بافرهای انحلال متفاوت برای حل کردن اینکلوژن بادی اینترفرون بتا 1-b بود. بهینه سازی انحلال برای مقدار مشخص اینکلوژن بادی در پروسه خالص سازی و بازتاخوردگی پروتیین نوترکیب بسیار با اهمیت است. انحلال اینکلوژن بادی ها تحت شرایط متفاوت با استفاده از اوره، اس دی اس، و سه حلال آلی متفاوت در شرایط ویژه PH انجام شد. نتایج به دست آمده نشان داد غلظت های متفاوت 1-پروپانول، 2-پروپانول و 2-بوتانول بدون حضور اوره و اس دی اس قادر به حل کردن اینکلوژن بادی نبودند. ترکیب های مختلفی از اس دی اس و اوره با حلال های آلی برای انحلال اینکلوژن بادی اینترفرون بتا 1-b مورد آزمایش قرار گرفت. بهترین نتیجه با محلول انحلال حاوی 1% اس دی اس به همراه 25% 1- پروپانول و 25% 2- -بوتانول با PH 2 به دست آمد، که این بافر توانست به صورت موثر اینکلوژن بادی را با خلوص بالای اینترفرون بتا 1-B حل نماید

Keywords:

اینترفرون بتا 1-b , اینکلوژن بادی , پروتیین نوترکیب