همراه با درختان جنگلی در استان گیلان Diplodia sapinea و Botryosphaeria dothidea

در طول سال های 1391 تا 1394 بررسی های متعددی در نواحی جنگلی شمال ایران با هدف جداسازی و شناسایی قارچ های بیمارگر شاخه و تنه بر روی درختان جنگلی انجام گردید. نمونه برداری از شاخه و تنه درختان دارای نشانه های بیماری و همچنین بقایای چوبی کف جنگل انجام شد. عمل جداسازی از بافت های بیمار درختان و همچنین اندام باردهی یعنی پیکنیدیوم های یا آسکوکارپ های تشکیل شده بر روی سطح بقایای چوبی صورت گرفت. بافت های آلوده با استفاده از محلول هیپوکلریت سدیم 1/5 درصد به مدت دو تا سه دقیقه ضد عفونی و سپس دو مرتبه با آب استریل شستشو داده شدند و در نهایت در زیر هود لامینار خشک شدند. تعداد 10 تا 12 قطعه کوچک 0/5) میلی متر) از نواحی بین بافت سالم و آلوده در هر نمونه جدا و بر روی محیط کشت عصاره مالت-آگار (MEA) حاوی یک گرم بر لیتر از سولفات استرپتومایسین (MEAS) کشت داده شدند. تشتک های پتری کشت داده شده جهت رشد پرگنه های قارچی به مدت 10 تا 15 روز در دمای 25 ºC نگهداری شدند. علاوه بر این عمل جداسازی از ساختارهای باردهی تشکیل شده بر روی سطح بقایای چوبی جمع آوری شده نیز انجام گردید. پرگنه هایی که دارای ویژگی های مربوط به اعضای خانواده Botryosphaeriaceae بودند به محیط کشت جدید MEA منتقل و در دمای 25ºC نگهداری شدند. کشت های خالص شده هر جدایه بر اساس ویژگی های ریخت شناختی، محیط کشت و مقایسه ترادف های ITS و TEF شناسایی شدند. در این مطالعه 24 جدایه از Botryophaeriaceae از بافت آلوده درختان و بقایای چوبی جداسازی گردید. بر اساس ویژگی های ریخت شناختی و مقایسه ترادف های DNA دو گونه 23) Botryosphaeria dothidea جدایه) و Diplodia sapinea (یک جدایه) شناسایی شدند. گونه B. dothidea از درختان بیمار انار، توسکا، ممرز، انجیلی، ولیک، سفید پلت و گوجه سبز جداسازی شدند در حالیکه که D. sapinea تنها از بقایای چوبی درخت کاج به دست آمد. بر اساس اطلاعات موجود این مطالعه اولین گزارش از B. dothidea بر روی درختان توسکا، ممرز، انجیلی، ولیک، سفید پلت و گوجه سبز می باشد.

Keywords:

شانکر , درختان جنگلی , ITS , Diplodia sapinea , Botryosphaeria dothidea