بررسی میزان فعالیت پیشبرندهCaMV35S دربافت های مختلف گیاهان تنباکوی تراریخت

هر ژن از سه بخش اصلی شامل پیشبرنده ، بدنه اصلی ژن و خاتمه دهنده تشکیل شده است که بدون پیشبرنده امکان بیان ژن وجود ندارد. عموما پیشبرنده برای هر ژن اختصاصی می باشد و منجر به تنظیم محصول نهایی ژن می گردد. یکی از عمومی ترین پیشبرنده هایی که توسط مهندسین ژنتیک گیاهی جهت بیان ژن در گیاهان استفاده می گردد پیشبرنده CaMVS35 می باشد. اگرچه فرض کلی بر این است که CaMVS35 یک پیشبرنده دایمی می باشد، اما بعضی گزارش ها مبین این موضوع است که این پیشبرنده در همه بافت ها و در همه انواع سلولها بیان نمی شود. به علاوه اطلاعات قابل دسترس درباره نحوه بیان این پیشبرنده در همه سلولهای ممکن و بافت های مختلف و در مراحل اولیه نمو ناقص می باشد. با توجه به محدودیت های اشاره شده در فوق در این تحقیق جزییاتی از فعالیت این پیشبرنده در بافت های مختلف گیاه تنباکو مورد بررسی قرار گرفت . جهت بررسی فعالیت این پیشبرنده از گیاهان تراریخته تنباکویی که یکی از آنزیم های کلیدی دخیل در مسیر بیوسنتز ویتامین E آن به کمک روش RNAi و تحت پیشبرنده CaMVS35 غیرفعال گردیده بود استفاده شد. خاموشی ژن مسیول آنزیم ذکر شده منجر به کاهش محتوی ویتامین E در گیاهان تراریخته نسبت به شاهد می گردد. به همین خاطر محتوی ویتامین E بافت های مختلف از جمله ریشه ، برگ ، قسمت های مختلف گل ، بذرهای بالغ و غیربالغ محاسبه گردید و میزان درصد کاهش ویتامین E نسبت به شاهد به عنوان فعالیت پیشبرنده در نظر گرفته شد. نتیجه بررسی ها نشان داد که این پیشبرنده در بافت های برگ ، کاسبرگ ، گلبرگ ، پرچم و مادگی بیان بسیار بالا در بافت های ریشه ، در بذور نابالغ بیان متوسط و در بذور بالغ بیان بسیار پایینی دارد.

Keywords:

پیشبرنده CaMVS35 , RNAi , بیان ژن , بذور بالغ , گیاه تنباکو , گیاه تراریخته .