ویژگی ها و سینتیک لاکتات دهیدروژناز در سرطان پستان و بافت نرمال پستان

میزان بالای گلیکولیز هوازی (تبدیل گاوکز به لاکتات در حضور اکسیژن ) یکی از مشخصات اصلی تومورهای مختلفمی باشد که نخستین بار توسط اوتو وتربرگ مطرح شد. مسیر گیکولیز شامل چندین آنزیم می باشد که یکی از آن هالاکتات دهیدروژناز (LDH) می باشد. میزان بیان و فعالیت این آنزیم در بسیاری از تومورها از جمله تومورهای پستان افزایش می یابد. هدف از مطالعه حاضر بررسی مشخصات و کینتیک آنزیم LDH در تومورهای پستان و بافت طبیعی آن است.10 نمونه تومور پستانی و بافت طبیعی مربوطه از بیماران مبتلا به سرطان پستان، مستقیما از اتاق عمل برداشت شده وبلافاصله در نیتروژن مایع قرار داده شد. آزمایشات بر روی نمونه های هموژنیزه شده و تحت شرایط بهینه از لحاظسوبسترا و کوفاکتور انجام گرفت، میزان فعالیت آنزیم براساس تغییرات جذب نوری در طول موج 340 نانومتر که در اثر مصرف NADH یا تولید آن است انجام گرفت. فعالیت آنزیم با استفاده از نرم افزار MPA و کینتیک آنزیم Km و (Vmax) با استفاده از نرم افزار Kinetic program و با استفاده از رگرسیون غیر خطی بدست آمد. Km آنزیم پیروات و NADH در نمونه های توموری و طبیعی یکسان بوده و تفاوت معنا داری را نشان نداد اما Km آنزیم برای لاکتات و NDA در نمونه های توموری بالاتر از نمونه های سالم بود (به ترتیب p=0.07) و Vmax (p=0.15) آنزیم برای پیروات، لاکتات، NADH و NAD در نمونه های توموری بالاتر بوده است (p=0.01) برای همه مواد نتایج این مطالعه نشان داد که تمایل آنزیم برای لاکتات و DNA در نمونه های توموری در مقایسه با بافت طبیعی کمتر می باشد، به عبارت دیگر لاکتات برای تومورها مفید بوده و سلول های سرطانی تمایلی برای تبدیل آن به پیروات ندارند. حال اگر Km آنزیم لاکتات کاهش یابد چه اتفاقی رخ خواهد داد در این حالت لاکتات بیشتر و بیشتر به پیروات تبدیل شده و لاکتات نمی تواند نقش کلیدی خود را در تومورزایی ایفانماید. همچنین نتایج ما نشان می دهد که ایزوزیم LDH-1 ممکن است ساختار متفاوتی از لحاظ ترتیب آمینو اسیدها و ترکیب جایگاه فعال داشته باشد.