تخلیص سازی و بیان پروتیین ORF2 ویروس هپاتیت E در باکتری اشرشیا کولی
Publish place: The First National Conference on Biological Findings
Publish Year: 1395
نوع سند: مقاله کنفرانسی
زبان: Persian
View: 425
نسخه کامل این Paper ارائه نشده است و در دسترس نمی باشد
- Certificate
- من نویسنده این مقاله هستم
این Paper در بخشهای موضوعی زیر دسته بندی شده است:
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
BIOC01_171
تاریخ نمایه سازی: 11 خرداد 1397
Abstract:
هپاتیت E عامل هپاتیت حاد در میان مردم از گروه های سنی مختلف است و میزان مرگ و میر بالایی را شامل میشود بخصوص درزنان باردار که تا 30 % اعام شده است ، بنابراین پیشگیری اولیه از عفونت HEV ضروری است. هدف از این مطالعه به دست آوردن پروتیین ) ORF2 ( ، که ممکن است یک کاندید مناسب برای واکسن هپاتیت E در آینده باشد. ژن کوتاه شده orf2 ، اسید آمینه های 112 تا 660 از توالی پروتیین کپسید HEV بهینه سازی شده و سنتز شده را، کد گزاری می کند. بعد از القا با ایزوپروپیل- -D-β IPTG( thiogalactopyranoside ( و بهینه سازی شرایط احراز، پروتیین هدف به وضوح مشخص شده و توسط کروماتوگرافی کی لیت 2+(Ni ( پالایش می شود. پروتیین پالایش شده توسط الکتروفورز ژل پلی آکریل آمید سولفات سدیم دودسیل و روش وسترن بات استفاده می شود. نتایج به دست آمده از بهینه سازی شرایط احراز، نشان داد که، بالاترین احراز پروتیین، با اضافه کردن IPTG در غلظت نهایی، به اندازه یک میلی متر در 37 درجه سانتی گراد در هر چهار ساعت، به دست آمد. احراز و پالایش کردن پروتیین ORF2 با SDS-PAGE و روش وسترن بات، خیلی کوتاه تر شد. آنالیز SDS-PAGE یک پروه پروتیینی در حدود 50 کیلو دالتون را نشان داد. SDS-PAGE پروتیین خالص نشان داد که بالاترین مقدار از پروتیین هدف در بافر شستشو با 4/5 ph به دست آمد. عملکرد پروتیین خالص در حدود 1 میلی گرم بر لیتر بود.
Keywords:
Authors
محیا داستانی
کارشناس ارشد، گروه بیوتکنولوژی، واحد علوم و تحقیقات، دانشگاه آزاد اسلامی، دامغان، ایران.
اصغر عبدلی
استادیار ویروس شناسی، عضو هیات علمی هپاتیت و ایدز انستیتو پاستورایران، تهران، ایران.
محمدرضا آقاصادقی
دانشیار بیوتکنولوژی پزشکی، رییس بخش هپاتیت و ایدز انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران.