بیش بیانی ژن CNTF انسانی در سلول های غلاف پوشاننده پیاز بویایی به وسیله وکتورلنتی ویروسی به عنوان روشی جهت ژن درمانی سیستم عصبی

در نرونهای سیستم عصبی مرکزی (CNS) پستانداران بالغ، رشد و بازسازی بسیار ضعیفی بعد از بروز آسیب مشاهده میشود. جهت رشد مجدد اعصاب آسیب دیده در ضایعه نخاعی و اعصاب محیطی میبایست شرایط و محیط برای رشد آکسونها مساعد باشد. رساندن ژن درمانگر و محرک رشد آکسونها ازجمله راهکارهای بازسازی آسیب است. امروزه ازجمله راه های انتقال این ژنهای درمانگر استفاده از وکتورهای ویروسی از جمله لنتی ویروسها به علت بازده بالا در انتقال به هدف و توانایی حمل حجم مناسبی از DNA خارجی در ژن درمانی ضایعه است.مواد و روشها:در این تحقیق پس از تولید پلاسمید نوترکیب و ترانسفروماسیون آن به باکتری DH5 آلفا به روش شوک حرارتی صورت گرفته و در مرحله بعد تولید لنتی ویروس حامل ژن CNTF انسانی به روش کلسیم فسفات در سلولهای پکیجینگ HEK293T و انتقال آنها به سلولهای غلاف پوشاننده پیاز بویایی به عنوان سلول هدف انجام شد.همچنین بررسی صحت انتقال توسط ژن گزارشگر و RT-PCR صورت پذیرفت.نتایج:با مشاهده سلولهای غلاف پوشاننده پیاز بویایی در زیر میکروسکوپ فلورسنت که به رنگ سبز درآمدهاند میتوان به صحت انتقال ژن مد نظر با ویورس نوترکیب پی برد، با استفاده از وکتور لنتی ویروسی میتوان ژن مد نظر جهت ژن درمانی را به صورت دایمی در سلول هدف بیان نمود و باعث بیش بیانی و افزایش اثرات درمانی آن شد.

Keywords:

وکتور لنتی ویروسی , ژن درمانی , سلولهای غلاف پوشاننده پیاز بویای