کلونینگ ژن TNF-α در میکروب اشرشیا کلی

بیوتکنولوژی علم جدیدی نیست. سابقه استفاده از میکروارگانیسم ها برای تولید مواد خوراکی نظیرنان،سرکه، ماست وپنیر به پیش از 8 هزار سال قبل میرسد. آرتریت روماتویید یکی از شایع ترین بیماری های التهابی و خود ایمنی مزمناست که حدود 3 - 5 / 0 درصد مردم جهان به آن مبتلا می باشند. پس از تایید نقش TNF در این التهاب ها و کاراییبالای روشهای مسدود کردن TNF در حیوانات مدل با استفاده از آنتی بادی های مونوکلونال و پروتیین های نوترکیبانجام شد. با توجه به اهمیت این پروتیین بعنوان یکی از اولویت های تحقیقات پزشکی ، بیان ژن مربوطه در سلولهایباکتریایی ضروری بنظر می رسد. استخراج RNA از شخص داوطلب انجام شد سنتز CDNA و واکنش زنجیره ایپلیمراس جهت تکثیر اختصاصی ژن TNF انجام شد و در نهایت ژن TNF-σ به وکتور pTZ57R/T منتقل شد وکلونینگ توسط واکنش زنجیره ای پلیمراس و برش توسط آنزیم های NcoI و XhoI تایید گردید. نتایج نشان می دهدکه می توان با کلون نمودن ژن TNF-σ در باکتری اشرشیاکلی مقدار پروتیین موردنظر را افزایش داده که در درمانآرتریت روماتویید مورد استفاده قرار داد.

Keywords:

آرتریت روماتویید , ژن TNF-σ اشرشیا کلی , کلونینگ , آنتی بادی مونوکلونال , پروتیین های نوترکیب