مرضیه محمدخانی - دانش آموخته کارشناسی ارشد بیوتکنولوژی کشاورزی
ندا میرآخورلی - استادیار دانشگاه شهرکرد گروه اصلاح نباتات و بیوتکنولوژی دانشگاه شهرکرد
رحمان امامزاده - استادیار دانشگاه اصفهان گروه زیست شناسی، بیوشیمی
فریبرز خواجعلی - استاد دانشگاه شهرکرد گروه علوم دام، تغذیه طیور

پروبیوتیک ها میکروارگانیسم های غیربیماریزا و بیضرری هستند که در روده انسان و حیوانات وجود دارند. این میکروارگانیسم ها نه تنها ایجاد بیماری نمیکنند، بلکه اثرات بسیار مطلوبی بر عملکرد و سلامت دام و طیور دارند Lactococcus lactis گونه ای از این باکتری ها است که به عنوان کاندیدی برای تولید پروتیین های مفید بیولوژیکی انتخاب شده است. آنزیم لیکیناز نوعی بتاگلوکاناز است که بتا 3-1 4-1 گلوکان ها لیکینان ها را هیدرولیز میکند. لیکینان ها ترکیبات پلیساکاریدی در دیواره سلول های گیاهان عالی خانواده پواسه هستند که ظاهرا منحصر به دیواره سلولی اندوسپرم گرامینه ها همچون جو، چاودار، سورگوم، برنج و گندم میباشند. هدف از این مطالعه بیان ژن لیکیناز در باکتری پروبیوتیک لاکتوکوکوس لاکتیس و تولید ترشحی این آنزیم به منظور دستیابی به مکمل غذایی برای طیور است که توانایی تجزیه بتاگلوکان جو را برای دستگاه گوارش طیور ایجاد کند. این امر امکان جایگزینی جو بجای ذرت در جیره غذایی طیور را فراهم میسازد. برای دستیابی به این منظور ژن licBM2 کد کننده ی آنزیم بتا 3-1 4-1 گلوکاناز به همراه سیگنال پپتید ترشحی و سایت های برشی در پلاسمید pNZ8149 کلون گردید. انتقال پلاسمید نوترکیب به باکتری لاکتوکوکوس لاکتیس با روش الکتروپوریشن صورت گرفته و غربالگری کلنی های ترانسفرم شده توسط توانایی رشد باکتری بر محیط انتخابی لاکتوز انجام شد.القای بیان ژن بوسیله ی القاگر نیسین صورت گرفت و بررسی میزان بیان ژن با اندازه گیری فعالیت آنزیمی پروتیین نوترکیب مطالعه شد. با افزایش زمان القاء بیان ژن و میزان آنزیم تولید شده و فعالیت حاصل از آن افزایش مییابد. دستاورد این مطالعه کلون سازی و بیان موفق ژن licBM2در باکتری گرم مثبت لاکتوکوکوس لاکتیس و تولید پروبیوتیک با پروتیین نوترکیب میباشد

بتاگلوکاناز،پروبیوتیک،تغذیه طیور،لاکتوکوکوس لاکتیس