ردیابیArmillaria melleaعامل پوسیدگی آرمیلاریایی ریشه و طوقه پسته از خاک بااستفاده از روش های مبتنی بر PCR

بیمارگرهای خاکزاد ایجاد کننده زوال تدریجی ومرگ ناگهانی از مهمترین عوامل کاهش محصول در باغ و نهالستان های پسته می باشند. تشخیص به موقع بیمارگر پوسیدگی آرمیالاریایی ریشه و طوقه درخاک ، به دلیل رشد آهسته و پنهان بیمارگر نقش مهمی در مدیریت موثر این بیماری و کاهش خسارت دارد. به همین منظور شناسایی و ردیابی مولکولی Armillaria mellea از خاک درختان پسته بر اساس تکثیر قطعه ی اختصاصی از ناحیه rDNA-ITS با استفاده از آغازگر اختصاصیAR1/AR2 انجام گرفت. طی سال های 1397-1396، تعداد 4 جدایه A. mellea جداسازی و شناسایی گردید. درصد های مختلف آلودگی خاک به منظور بررسی حساسیت پرایمرها برای ردیابی بیمارگر تهیه گردید. استخراج DNA بطور مستقیم از خاک ناحیه ی رایزوسفر ریشه و طوقه ی درختان آلوده یا مشکوک به پوسیدگی آرمیالاریایی و خاک های آلوده با درصد مختلف آلودگی انجام شد. حساسیت جفت پرایمر با استفاده از چهار جدایه هدف، نمونه های خاک ناشناخته و خاک مصنوعی مورد بررسی قرار گرفت. نتایج نشان داد که این جفت آغازگر قادر به تکثیر اختصاصی قطعه 724 جفت بازی از ژنوم دی.ان.ای بیمارگر میباشد.. که ردیابی مستقیم بیمارگر از خاک بدون نیاز به جداسازی و کشت بیمارگر در محیط های کشت اختصاصی امکان پذیر میباشد. بر اساس نتایج به دست آمده، این روش ردیابی بیمارگر، به دلیل دقت وحساسیت، به عنوان مناسب ترین روش برای شناسایی A. mellea از نمونه های خاک تشخیص داده شدکه میتواند کمکی برای تشخیص بیماری به عنوان بخشی از راهکار کنترل این بیماری مورد استفاده قرار گیرد.

Keywords:

آغازگر اختصاصی , پوسیدگی بندکفشی , پسته