بررسی میزان باروری اووسایت های آلوده به بیوتایپ های Cythopathic Non-cythopathic ویروس Bovine Viral Diarrhoea میزان چسبندگی اسپرماتوزوا بر روی Zona Pellucida در شرایط In Vitro Fertilization

هدف از این مطالعه، بررسی میزان باروری اووسایت های آلوده شده به بیوتایپ های Cythopathic (CP) Noncythopathic (BVDV) (NCP) ویروس Bovine Viral Diarrhoea چسبندگی اسپرماتوزوا بر روی لایه(Zona Pellucida (ZP در شرایط In Vitro Fertilization (IVF) است. تعداد 383 اووسایت گاو با 106 TCID50/mL، CP &NCP BVDV برای مدت ساعت در شرایط38/5 ˚C قرار داده شد. 106 105 اسپرماتوزوا سالم گاو حاوی محیط IVF به اووسیت های آلوده (n=383) نیز اووسیت های سالم (گروه شاهد) (n=175) در گروه های 10 تایی اضافه شد. این مطالعه بار تکرار گردید. به منظورارزیابی چسبندگی اسپرم بر روی لایه ZP نیز میزان باروری، سلولهای تخم 24 ساعت بعد از انکوباسیون در فرمالین درصد %2 Glutaraldehyde ثابت شده سپس با 10μg/mL رنگ Hoechst 33342 رنگ آمیزی شدند. میزان باروری اووسایت ها وتعداد اسپرم های چسبیده بر روی ZP با استفاده از میکروسکوپ فلورسنت مورد ارزیابی قرار گرفت. اطلاعات بدست آمده با استفاده از آزمون مربع کای مورد تجزیه تحلیل آماری قرار گرفت. میزان باروری اووسایت های آلوده به CP NCP BVDV با کمترین عیار اسپرماتوزوای (105) به ترتیب: %38 %22 در مقایسه با گروه شاهد (%48) بود، اما میزان باروری اووسایت های آلوده به بایوتایپ های CP NCP BVDV در بیشترین عیار اسپرماتوزوا (106) به ترتیب: %19 %48 بود که نسبت به گروه شاهد (%74) کاهش معنی داری را نشان داد .(P<0.05) تعداد اسپرم های چسبیده بر روی لایه ZP اووسایت ها در گروه شاهد اسپرم با غلظت 106 قابل شمارش نبود، اما تعداد اسپرم های چسبیده بر روی لایه ZP اووسیت های آلوده بهCP NCP BVDV قابل شمارش بوده به ترتیب به طور متوسط: 127 151 اسپرماتوزوا بر روی هر اووسایت بارور شده بود. تعداد اسپرم های چسبیده در گروه 105 بر روی لایه ZP اووسایت های بارور شده آلوده به بایوتایپ های CP NCP BVDV به ترتیب به طور متوسط: 120 113 اسپرم بود که در مقایسه با گروه شاهد (97) اختلاف معنی داری را نشان می داد .(P<0.05) از این بررسی نتیجه گرفته می شود که ویروس BVDVباعث تداخل در باروری اووسیت های آلوده شده نیز قادر به کاهش میزان چسبندگی اسپرماتوزوا بر روی لایه ZP اووسایت می باشد.