ارایه یک متد برای باکتری نوترکیب بیان کننده ی ژن انسانی

گروهی از آنزیم های ماتریکس خارج سلولی هستند که وظیفه هضم انواع پروتیین های موجود در فضای بین سلولی را بر عهده دارند و نقش آنها در مراحل مختلف سرطان مانند تکثیر سلولی ، آنژیوژنز، آپوپتوز، تبدیل سلول های اپتیلیال به مزانشیمال (EMT) به خوبی شناخته شده است. سرطان های مجرای گوارشی 4 دیسپلازی های بدخیمی هستند که قادرند تمامی مجرای گوارشی را در هر ناحیه ای از مری، معده، پانکراس، روده کوچک، کلون و رکتوم درگیر نمایند. به علت ماهیت پیشرونده تنها تشخیص زودرس و درمان مناسب میتواند شانس بقای مبتلایان را افزایش دهد. اپس از سنتز cDNA از نمونه RNA بافت تومور بیمار مبتلابه سرطان مری، توسط واکنش PCR RT_ و با پرایمرهای طراحی شده، توالی موردنظر از ژن (MMP13) تکثیر یافت. پس از انجام خالص سازی، قطعه تکثیرشده و پلاسمید بیانی PET21(b)+ توسط آنزیم های محدوالاثر HINDIII و Xho1 برش خورده و کلونینگ قطعه موردنظر به داخل پلاسمید انجام شد. با توجه به نتایج به دست آمده، این قطعه ژنی توانایی کلون شدن در میزبان پروکاریوتی را دارا بوده و باکتری قادر است به کمک القاگر مناسب به میزان فراوانی پروتیین موردنظر را تولید کند. ازاین جهت میتوان از این پروتیین نوترکیب برای تهیه کیت تشخیصی سرطان مری به واسطه تکنیک الایزا استفاده برد.

Keywords:

لاتین MMP13 , PET21(b)+ , BL21 , وکتورپلازمدی , TOP10