شناسایی گاما آمینو بوتیریک اسید (گابا) تولید شده توسط باکتری لاکتوباسیلوس برویس به روش کروماتوگرافی لایه نازک

گاما آمینو بوتیریک اسید (گابا) اسید آمینه چهار کربنی غیرپروتئینی موجود در دستگاه عصبی مهره داران بوده که توسط آنزیم گلوتامیک اسید دکربوکسیلاز تولید میشود. این آنزیم در باکتریهای اسید لاکتیک فعالیت بالایی دارد. گابا به طور طبیعی در برخی مواد غذایی وجود دارد و به طور شیمیایی ترکیب اصلی در داروهای ضد افسردگی میباشد، اما به علت برخی عوارض گابای تولید شده با روش های شیمیایی، به تولید بیولوژیکی گابا روی آورده شده است. در این مطالعه، تلقیح باکتری لاکتوباسیلوس برویس در pH حدود 6 انجام گرفت. عمل انکوباسیون به مدت 120 ساعت در دمای 30 درجه سانتیگراد صورت پذیرفت. بعد از انجام عمل تخمیر به منظور بررسی گابای تولید شده در خارج سلول، محلول رویی عصاره سانتریفیوژ شده 10000 دور در دقیقه در دمای 4 درجه سانتیگراد به مدت 10 دقیقه) و از سوپرناتانت آن برای تشخیص گابای تولید شده استفاده شد. جهت شناسایی گابا تولید شده توسط لاکتوباسیلوس برویس از روش کروماتوگرافی لایه نازک و بستر سیلیکاژل به عنوان فاز ثابت و از حلال مخصوص گابا (استیک اسید، بوتانول و آب مقطر) استفاده گردید. پس از انجام آزمون و آشکارسازی به وسیله معرف نینهیدرین باند نمونه روبروی باند گابای خالص تشکیل شد و در نهایت امکان تولید گابا مورد تایید قرار گرفت.

Keywords:

گاما آمینو بوتیریک اسید , روش بیولوژیکی , لاکتوباسیلوس برویس , کروماتوگرافی لایه نازک.