تشخیص و شناسایی گونه آناپلاسما در بز با استفاده از روش PCR- RFLP در استان خراسان ضوی

هدف: آناپلاسموز بیماری ناشی از پاتوژن های جنس آناپلاسما ( ریکتزیال ها: آناپلاسماتاسه آ ) می باشد. آناپلاسما مارژیناله و آناپلاسما اویس باکتری های داخل سلولی اجباری هستند که باعث بیماری با منشا کنه ای در نشخوارکنندگان اهلی و وحشی می گردند. از آنجایی که هیچ روش مولکولی برای تفریق و تشخیص گونه های آناپلاسما در بز به صورت متداول در ایران موجود نیست . در این مطالعه از روش مولکولی PCR برای تکثیر قسمتی از ژن MSP4 آناپلاسما اویس و آناپلاسما مارژیناله و از روش RFLP بعنوان ابزار تشخیصی حساس و اختصاصی که قادر است به طور همزمان این دو گونه آناپلاسما را در بز شناسایی کند؛ استفاده شد. مواد و روش کار: مطالعه حاضر در سال 1387 آغاز شد. حدودا 10 فارم مشکوک بر اساس تاریخچه شیوع آناپلاسموز گوسفندی در استان خراسان رضوی، در اطراف شهرستان مشهد انتخاب شدند. نمونه های خون از 93 بز جمع آوری شد. نمونه های خون جمع آوری شده برای تهیه گسترش های نازک خون برای بررسی میکروسکوپی و استخراج DNA برای آنالیز PCR مورد استفاده قرار گرفتند. نتایج و بحث : نتایج واکنش زنجیره ای پلیمراز ( PCR ) نشان داد که 46 نمونه از 93 نمونه ( 49/5 درصد ) برای آلودگی با گونه آناپلاسما مثبت بودند. بررسی میکروسکوپی گسترش های نازک خونی نشان داد که 18 نمونه از 93 نمونه ( 19/35 درصد ) دارای گنجیدگی های شبیه به آناپلاسما بودند. تمام 18 نمونه مثبتی که به وسیله آزمایش میکروسکوپی تعیین شده بودند با واکنش زنجیره ای پلیمراز تایید شدند، در حالی که هیچ ریکتزیایی از طریق میکروسکوپ نوری در 28 مورد مثبت واکنش زنجیره ای پلیمراز دیده نشد. تمام نمونه های مثبت آناپلاسما با روش RFLP آناپلاسما اویس تشخیص داده شدند. نتایج تحقیق ما نشان داد که اولا روش مولکولی PCR-RFLP می تواند به عنوان روشی مطمئن برای تشخیص آناپلاسموز مورد استفاده قرار گیرد، ثانیا آلودگی به آناپلاسما اویس در شمال شرق ایران وجود دارد و ثالثا آناپلاسموز گوسفندی باید در ایران مورد توجه قرار گیرد.

Keywords:

آناپلاسما اویس , آناپلاسما مارژیناله , PCR-RFLP , ژن MSP4 , خراسان رضوی