حسین وزینی - دانشجوی دکتری، گروه انگل شناسی، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس
فاطمه غفاری فر - دانشیار، گروه انگل شناسی، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس
زهره شریفی - دانشیار، گروه ویروس شناسی، مرکز تحقیقات موسسه عالی آموزشی پژوهشی طب انتقال خون
عبدالحسین دلیمی اصل - استاد، گروه انگل شناسی، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس

سابقه و هدف: توکسوپلاسموزیس از بیماری های شایع جهان است و بیشتر به علت عوارض وخیمی که در موارد مادرزادی و بیمارانمبتلا به ایدز ایجاد می کند، اهمیت دارد. یکی از راه های پیشگیری از این انگل در انسان و دام استفاده از واکسن می باشد. آنتی ژن گرانولی (GRA7) 7 یک آنتیژن فشرده ترشحی 29 کیلودالتونی توکسوپلاسما گوندهای می باشد که در واکویل پارازیتوفروس تولید شده، توسطسلول های آلوده میزبان آزاد میشود و به عنوان کاندیدای تهیه واکسن مطرح می باشد. مواد و روش ها: در این مطالعه تجربی پلاسمید حاوی ژن GRA7 از باکتری TOPO استخراج شد. سپس این پلاسمید با آنزیم های BamH1 و EcoR1 برش داده شد. ژن جدا شده وارد پلاسمید pcDNA3 گردید. این کلونینگ با روش های PCR و تعیین توالی تایید شد. بیان پروتیین نیز با روشهای SDS-PAGE و وسترن بلات تایید شد. نتایج: نتایج نشان داد که ژن GRA7 در پلاسمید pcNDA3 کلون شده است و نتایج PCR پلاسمید pcDNA3 حاوی ژن GRA7 قطعه 733bp را نشان داد. بیان pcGRA7 در سلول های CHO با استفاده از روش های SDS-PAGE و وسترن بلات باند 29 کیلودالتونی را نشان داد.نتیجه گیری: نتایج حاصل نشان داد که کلونینگ ژن GRA7 در پلاسمید pcNDA3 انجام شده و پلاسمید نوترکیب در سلول های یوکاریوتیک بیان گردیده است لذا، قابلیت آن را دارد که برای تحقیقات تهیه واکسن DNA استفاده شود.و تعیین توالی تایید

سویه، RH توکسوپلاسما گونده ای، کلونینگ، ژن GRA7، پلاسمید یوکاروتی pcDNA3