ارزیابی بیان فاکتور محرک کلنی گرانولوسیت نوترکیب انسانی با کدون بهینه شده در دو سویه بیانی اشریشیا کلی Origami وBL۲۱
Publish place: New Cellular Biotechnology - Molecular، Vol: 5، Issue: 19
Publish Year: 1394
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: Persian
View: 261
This Paper With 6 Page And PDF Format Ready To Download
- Certificate
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
JR_NCMBJ-5-19_002
تاریخ نمایه سازی: 16 آذر 1400
Abstract:
سابقه و هدف: فاکتور محرک کلنی گرانولوسیت (G-CSF) به عنوان فاکتور رشد هماتوپوئیتیک می تواند سلول های بالغ خونی را تحریک نمایند و امروزه نوع نوترکیب آن در درمان نوتروپنی ناشی از شیمی درمانی سرطان های سرکوبگر میلوئید، پیوند مغز استخوان، شیمی درمانی در لوسمی میلوئید حاد و نوتروپنی مزمن و شدید به کار می رود. هدف از این مطالعه، مقایسه بیان G-CSF نوترکیب انسانی در دو سویه از اشریشیاکلی بوده است.
مواد و روش ها: ژن G-CSFانسانی با تغییر کدون های آن به صورت بهینه شده برای بیان در سیستم پروکاریوتی، در وکتور pGEM سنتز شده و در وکتور بیانی pET۲۳a همسانه سازی شد. سپس وکتور pET/G-CSF در دو سویه بیانی از اشریشیاکلی به نام Origami و BL۲۱، ترانسفرم شد و بیان آن در این دو میزبان مقایسه گردید.
یافته ها: نتایج هضم آنزیمی، صحت مراحل کلونینگ را در وکتور pET۲۳a نشان داد. همچنین تحت شرایط یکسان و بعد از القای میزبان ها با IPTG، بیشترین بیان پروتئین rhG-CSF در سویه Origami E. coli مشاهده گردید.
نتیجه گیری: نتایج این مطالعه نشان داد که سویه E. coli Origami سویه مناسبی جهت بیان G-CSF انسانی می باشد و این سویه می تواند به عنوان یک میزبان مناسب جهت بیان این پروتئین در مقیاس بالاتر پیشنهاد گردد.
Keywords:
granulocyte colony stimulating factor (hG-CSF) , Recombinant Protein , optimization of codon , E.coli Expression strains , فاکتور محرک کلنی گرانولوسیت انسانی , پروتئین نوترکیب , بهینه سازی کدون , سویه های بیانی اشریشیا کلی
Authors
سید حمید رضا خاتمی
Department of Bioscience and Biotechnology, Malek Ashtar University, Tehran, Iran.
رامین فلاح زاده
Department of Bioscience and Biotechnology, Malek Ashtar University, Tehran, Iran.
جلیل فلاح مهرآبادی
Department of Bioscience and Biotechnology, Malek Ashtar University, Tehran, Iran.
محمد داود غفاری
Young Researchers and Elites Club , North Tehran Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran